本文選題：重組金黃色葡萄球菌腸毒素 + A��； 參考：《衛(wèi)生研究》2013年06期

【摘要】：目的通過基因重組方式獲得高純度、高含量重組金黃色葡萄球菌腸毒素A(rSEA)。方法將金黃色葡萄球菌腸毒素A(SEA)基因片段插入pET28a載體中,測序并正確鑒定后,將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21(DE3)中,經(jīng)IPTG誘導(dǎo),表達(dá)目的蛋白。重組蛋白用Ni-NTA His蛋白親和柱純化。結(jié)果 SDS-PAGE結(jié)果表明成功表達(dá)了分子量約為30 kD的重組蛋白,經(jīng)Western blot和小鼠生物學(xué)鑒定,表達(dá)產(chǎn)物為重組金黃色葡萄球菌腸毒素A,并且具有較好的免疫原性,為制備抗金黃色葡萄球菌腸毒素A單克隆抗體及建立相應(yīng)的免疫學(xué)檢測方法奠定了基礎(chǔ)。結(jié)論構(gòu)建的rSEA表達(dá)載體穩(wěn)定,可高效表達(dá)目的 rSEA蛋白。
[Abstract]:Objective to obtain high purity and high content recombinant staphylococcus aureus enterotoxin A rSEAA by gene recombination. Methods Staphylococcus aureus enterotoxin Agna gene fragment was inserted into pET28a vector, sequenced and correctly identified. The recombinant plasmid was transformed into E. coli BL21DE3) and induced by IPTG to express the target protein. The recombinant protein was purified by Ni-NTA His protein affinity column. Results SDS-PAGE showed that the recombinant protein with molecular weight of about 30 KD was successfully expressed. The recombinant staphylococcus aureus enterotoxin A was identified by Western blot and mouse biology, and had good immunogenicity. It lays a foundation for the preparation of monoclonal antibodies against Staphylococcus aureus enterotoxin A and the establishment of corresponding immunological detection methods. Conclusion the constructed rSEA expression vector is stable and can efficiently express the target rSEA protein.
【作者單位】： 國家食品安全風(fēng)險(xiǎn)評估中心衛(wèi)生部食品安全風(fēng)險(xiǎn)評估重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)教研室;
【分類號】：R378

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本文編號：1794273