本文選題：PAX基因 + 慢病毒載體��； 參考：《現(xiàn)代預防醫(yī)學》2013年15期

【摘要】：目的構(gòu)建大鼠PAX2慢病毒表達載體,以期在大鼠腎臟中高效、穩(wěn)定表達。方法設計引物引入AgeⅠ酶切位點,使用PCR方法從質(zhì)粒pcDNA3.1-PAX2中擴增小鼠PAX2基因的編碼區(qū)序列,對所擴增出的目的片段回收純化。用In-Fusion技術將AgeⅠ內(nèi)切酶消化后目的片段交換連接入AgeI酶切的pGC-FU載體,構(gòu)建PAX2慢病毒表達載體pGC-FU-PAX2。酶切驗證并測序正確后,將質(zhì)粒pGC-FU-PAX2與慢病毒輔助包裝載體共轉(zhuǎn)染293T細胞,Western-blot驗證PAX2在轉(zhuǎn)染293T細胞中表達。結(jié)果通過PCR擴增獲得了PAX2基因,將PAX2克隆到慢病毒轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pGC-FU中,并在293T細胞中包裝產(chǎn)生慢病毒顆粒。結(jié)論成功構(gòu)建了PAX2慢病毒表達載體,為進一步從分子水平探討PAX2功能奠定了基礎。
[Abstract]:Objective to construct the expression vector of rat PAX2 lentivirus in order to express it efficiently and stably in rat kidney.Methods Primer was designed to introduce Age 鈪，

本文編號：1748235