本文選題：半乳糖凝集素類　切入點：間充質(zhì)干細胞　出處：《北京大學學報(醫(yī)學版)》2013年03期

【摘要】：目的:研究人Wharton’s jelly組織來源的臍帶間充質(zhì)干細胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)中半乳糖凝集素(Galectins)分子的表達情況。方法:無菌條件下取足月剖宮產(chǎn)術(shù)后的胎兒臍帶,分離Whar-ton’s jelly,組織塊法原代培養(yǎng)UC-MSCs。光鏡觀察獲得UC-MSCs形態(tài),用流式細胞術(shù)檢測其免疫學特性,茜素紅鈣結(jié)節(jié)染色及油紅O染色鑒定其分化為成骨細胞和脂肪細胞的能力。采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(reverse tran-scription-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測UC-MSCs中Galectins家族分子的mRNA表達情況,酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測UC-MSCs培養(yǎng)上清液中Galectin-3的含量。結(jié)果:組織塊法原代培養(yǎng)能獲得貼壁生長的UC-MSCs,流式細胞術(shù)檢測提示其高表達CD29/CD44/CD73/CD90及CD105表面標記,低表達造血細胞表面標記CD14、CD34及CD45和免疫排斥相關(guān)分子HLA-DR。在特定誘導條件下UC-MSCs具有成骨和成脂分化的能力。UC-MSCs可在mRNA水平表達Galectin-1,3,4,8,9,且能夠以細胞數(shù)目依賴的方式外分泌Galectin-3,不同密度接種組間差異均有統(tǒng)計學意義(F=16.901,P=0.002),但Galectin-3的分泌不具備時間依賴性。結(jié)論:應用組織塊法可以從Wharton’jelly組織中成功培養(yǎng)出UC-MSCs,且UC-MSCs可表達分泌型Galectin-3,為進一步研究UC-MSCs的免疫調(diào)控機制奠定了基礎。
[Abstract]:Aim: to study the expression of galactose lectin (Galectins) in human umbilical cord mesenchymal stem cells (UC-MSCs) derived from human Wharton's jelly tissue.Methods: umbilical cord of fetus after term cesarean section was taken under aseptic condition, Whar-ton's jellywas isolated and UC-MSCs were cultured by tissue block method.The morphology of UC-MSCs was observed under light microscope and its immunological characteristics were detected by flow cytometry. The ability to differentiate into osteoblasts and adipocytes was identified by alizarin red calcium nodule staining and oil red O staining.The mRNA expression of Galectins family in UC-MSCs was detected by reverse tran-scription-polymerase chain reaction reverse polymerase chain reaction (RT-PCR), and the Galectin-3 content in UC-MSCs supernatant was detected by enzyme-linked immunosorbent assay-ELISA-enzyme linked immunosorbent assay (Elisa).Results: UC-MSCs of adherent growth could be obtained in primary culture by tissue mass method. Flow cytometry showed that UC-MSCs expressed high expression of CD29/CD44/CD73/CD90 and CD105, and low expression of CD14, CD34, CD45 and HLA-DR.UC-MSCs have the ability of osteogenesis and adipogenic differentiation under certain inducement conditions. UC-MSCs can express Galectin-1P0. #number0# at the mRNA level, and excrete Galectin-3 in a manner dependent on the number of cells. There are significant differences among different density inoculation groups, but the secretion of Galectin-3 is significant.No time dependence.Conclusion: UC-MSCs can be successfully cultured from Wharton'jelly tissue by tissue block method, and UC-MSCs can express secretory Galectin-3, which lays a foundation for further study of immunological regulation mechanism of UC-MSCs.
【作者單位】： 北京大學第三醫(yī)院風濕免疫科;
【基金】：國家自然科學基金(81072474,81273293) 北京市自然科學基金(7112143)資助~~
【分類號】：R329

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本文編號：1721983