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HRS干預(yù)腹腔鏡小型豬肝臟缺血再灌注合并肝損傷肝臟再生的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-04-03 13:42

  本文選題:腹腔鏡 切入點(diǎn):小型豬 出處:《東北農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:肝部分切除術(shù)是肝臟移植和肝臟腫瘤治療的經(jīng)典方法。而肝臟強(qiáng)大的再生功能是肝部分切除術(shù)后肝功能恢復(fù)的保證。腹腔鏡手術(shù)微創(chuàng)、術(shù)野清晰、對(duì)機(jī)體刺激小的優(yōu)勢(shì)使腹腔鏡手術(shù)的應(yīng)用和推廣也越來(lái)越越廣泛。為探討腹腔鏡手術(shù)的安全性、可行性以及對(duì)疾病的治療效果,以腹腔鏡技術(shù)構(gòu)建動(dòng)物模型的研究也越來(lái)越受到關(guān)注,本試驗(yàn)室已經(jīng)成功利用腹腔鏡技術(shù)構(gòu)建小型豬消化道瘺管動(dòng)物模型、小型豬腎衰模型,小型豬肝損傷模型等多個(gè)動(dòng)物模型,為臨床研究和比較醫(yī)學(xué)提供大量的科研依據(jù)。本試驗(yàn)在小型豬肝損傷模型的基礎(chǔ)上,通過(guò)門(mén)靜脈注入HRS,通過(guò)對(duì)相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè),綜合評(píng)價(jià)HRS對(duì)肝損傷后再生的影響。本研究選取24頭小型豬,隨機(jī)分為三組,每組8頭,分別為假手術(shù)組(A組)、模型組(B組)、HRS干預(yù)組(C組)。A組僅建立氣腹和手術(shù)通路,翻動(dòng)肝葉,不做其他手術(shù)操作;B組進(jìn)行腹腔鏡右半肝缺血60min合并左半肝切除術(shù);C組行門(mén)靜脈插管于再灌注前10min注入HRS,其余操作同B組。試驗(yàn)通過(guò)建立氣腹、選定手術(shù)通路、分離膽囊管和膽囊動(dòng)脈、右半肝缺血60 min同時(shí)行門(mén)靜脈插管、于再灌注10min前按10ml/kg注射HRS,缺血60mi n后貫穿結(jié)扎肝實(shí)質(zhì)進(jìn)行腹腔鏡左半肝切除、沖洗腹腔、取出離斷的的肝實(shí)質(zhì)、縫合腹腔等步驟完成腹腔鏡手術(shù)。于術(shù)后1d、2d、3d繼續(xù)按10ml/kg注入HRS。并于術(shù)前、術(shù)后1d、2d、3d、5d、7d采取血液樣本,檢測(cè)指標(biāo)包括:相應(yīng)試劑盒檢測(cè)肝功能(LDH、ALP、TP),ELISA檢測(cè)透明質(zhì)酸(HA)及血管生成因子(VEGF、Ang-1、Ang-2)血清濃度變化。于術(shù)前、術(shù)后1d、5d、7d采取肝組織樣本,分別用于HE染色進(jìn)行組織病理學(xué)觀察、PCNA免疫組織化學(xué)觀察、實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)肝再生相關(guān)因子(HGF、Cyclin-D1、TGF-β1)基因表達(dá)量變化。試驗(yàn)結(jié)果表明,三組腹腔鏡手術(shù)操作順利完成,術(shù)后恢復(fù)良好。缺血再灌注合并肝部分切除損傷后肝功能指標(biāo)變化表現(xiàn)為,血清ALP、LDH、TP在術(shù)后1d、2d變化最為明顯差異極顯著(P0.01),B組術(shù)后血清ALP、LDH高于C組,血清ALP在術(shù)后1d、2d差異顯著(0.01P0.05),血清LDH在術(shù)后1d差異極顯著(P0.01),血清TP變化B組與C組之間差異不顯著,說(shuō)明HRS有利于術(shù)后肝臟功能恢復(fù)。術(shù)后血清HA濃度呈先升高后降低的趨勢(shì)且在術(shù)后1d達(dá)到最大值差異極顯著(P0.01),同時(shí)間點(diǎn)B組術(shù)后血清HA濃度高于C組并且在術(shù)后1d、2d、3d均表現(xiàn)為差異極顯著(P0.01),說(shuō)明HRS能夠減輕肝竇內(nèi)皮細(xì)胞損傷,使HA代謝能力提高。損傷后的肝臟在術(shù)后1d細(xì)胞凋亡、壞死、炎性浸潤(rùn)最為嚴(yán)重,在術(shù)后7d逐漸恢復(fù),C組在術(shù)后7d組織結(jié)構(gòu)更為清晰完整,接近正常組織,極少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),而B(niǎo)組仍有較多炎性細(xì)胞浸潤(rùn),說(shuō)明HRS利于術(shù)后肝組織結(jié)構(gòu)的恢復(fù)。術(shù)后血清血管生成因子(VEGF、Ang-1、Ang-2)濃度變化呈先升高后降低的趨勢(shì)且B組低于C組,血清VEG F、Ang-1在術(shù)后3d差異極顯著(P0.01),血清Ang-2在術(shù)后3d、5d差異極顯著(P0.01),說(shuō)明HRS能夠上調(diào)術(shù)后VEGF、Ang-1、Ang-2濃度。術(shù)后肝細(xì)胞PCNA表達(dá)水平在術(shù)后1d達(dá)到最大且C組明顯高于B組差異極顯著(P0.01),在術(shù)后3d仍高于B組差異顯著(0.01P0.05),說(shuō)明HRS能夠促進(jìn)術(shù)后PCNA的表達(dá)。損傷后的肝組織HGF、Cyclin-D1基因表達(dá)量在術(shù)后1d達(dá)到最大值差異極顯著(P0.01)且C組高于B組差異極顯著(P0.01),T GF-β1表達(dá)量在術(shù)后3d達(dá)到最大值差異極顯著(P0.01)且C組明顯低于B組差異極顯著(P0.01),說(shuō)明上調(diào)肝再生促進(jìn)基因(HGF、Cyclin-D1)表達(dá),下調(diào)肝再生抑制基因TGF-β1的表達(dá)。以上試驗(yàn)結(jié)果表明:(1)HRS有利于肝缺血再灌注合并肝部分切除后肝組織結(jié)構(gòu)的恢復(fù),減輕炎性細(xì)胞浸潤(rùn),減輕肝竇內(nèi)皮細(xì)胞損傷程度,改善肝臟環(huán)境,能夠有效地促進(jìn)肝臟功能恢復(fù)。(2)HRS能夠上調(diào)肝缺血再灌注合并肝部分切除后血清中血管生成因子(VEGF、Ang-1、Ang-2)濃度,說(shuō)明HRS對(duì)VEGF、Ang-1、Ang-2的分泌調(diào)節(jié)起到促進(jìn)作用。(3)HRS促進(jìn)肝缺血再灌注合并肝部分切除后直接有絲分裂原HGF、Cyclin-D1、PCN A表達(dá)量增加,降低肝再生抑制基因TGF-β1的表達(dá)。說(shuō)明HRS對(duì)肝臟再生具有一定的調(diào)節(jié)促進(jìn)作用。
[Abstract]:In order to study the safety , feasibility and the effect of laparoscopic surgery on liver function after partial hepatectomy , the authors studied the safety , feasibility and treatment effect of laparoscopic surgery . The serum levels of serum ALP , LDH and TP were significantly higher than those in group C ( P0.01 ) . The changes of serum ALP , LDH and TP after operation were significantly higher than those in group C ( P0.01 ) . The expression of VEGF , Ang - 1 and Ang - 2 was significantly higher in group C than in group B ( P0.01 ) . The expression of HGF and Cyclin D1 was significantly higher in group C than in group B ( P0.01 ) .

【學(xué)位授予單位】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:R-332;R657.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1705433

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