本文選題：秀麗隱桿線蟲　切入點：益生菌　出處：《山東大學》2017年碩士論文

【摘要】：肥胖問題日益加劇,威脅著人類的健康。益生菌的作用逐漸被人們重視,而篩選抗脂肪堆積的益生菌有望應用于減緩肥胖問題。目前使用的益生菌主要是乳酸菌,而更多的益生菌有待于進一步發(fā)掘。海洋中微生物多樣性非常豐富,可以作為益生菌的來源。本文用從海洋生物牡蠣的內(nèi)臟中分離到的海洋菌以及從泡菜中分離到的乳酸菌喂養(yǎng)秀麗隱桿線蟲,對抗脂肪堆積益生菌進行篩選。另外,海洋中存在很多潛在新菌,本文對四株海洋新菌進行了多相分類,豐富了微生物資源。本論文取得如下成果:篩選到一株能使線蟲脂肪堆積減少的海洋菌ML182(Olleya marilimosa)。以秀麗隱桿線蟲為篩選模型,選取從采集于威海國際海水浴場(37°31'51.09"N,122°2'43.76"E)的牡蠣內(nèi)臟中分離到的32株海洋細菌、從泡菜樣品中分離到的18株細菌(其中有6株乳酸菌)、海洋微生物資源庫中的8株細菌和本文鑒定的4株菌為實驗對象,經(jīng)喂食研究發(fā)現(xiàn),篩選自牡蠣內(nèi)臟中的海洋菌ML182(Olleya marilimosa)能夠使線蟲體內(nèi)脂肪堆積減少,滅活的海洋菌ML182也能起到同樣的效果。因此選取該菌為候選益生菌。對秀麗隱桿線蟲喂食海洋菌ML182(Olleya marliimosa)后體內(nèi)生理生化反應和脂肪合成與分解相關基因進行了分析。檢測分析表明,海洋菌ML182對秀麗隱桿線蟲各項生命體征無影響,無毒性,僅使得秀麗隱桿線蟲體內(nèi)脂肪堆積減少。RT-qPCR結(jié)果顯示,秀麗隱桿線蟲體內(nèi)與脂肪合成有關的酶基因fasn-1、pod-2、fat-5、fat-6和fat-7下調(diào),與脂肪酸β-氧化有關的酶acs-2上調(diào),代表喂食海洋菌ML182的線蟲脂肪合成減少。完成了四株海洋新菌的多相分類,確定了四株菌的分類地位。YH6T是從中國威海沿海沉積物中分離得到的一株新的兼性厭氧菌,為革蘭氏陰性。唯一呼吸醌醌型為Q-8,主要脂肪酸(10%)為C16:0和summed feature 3(C16:1ω7c/iso-C15:02-OH)。極性脂成分為磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、心磷脂和其他一些未知的脂質(zhì)(磷脂、脂和磷氨基脂)�；蚪M的G+C含量為46.5 mol%。系統(tǒng)發(fā)生學上和YH6T最相近的物種為Vibrio variabilis(16SrRNA序列有 92.99%相似性),其次為 Paramoritella alkaliphila(92.55%)、Pseudoalteromonas aurantia(92.20%)Pseudoalteromonas citrea(92.20%)。系統(tǒng)發(fā)生學分析以及生理生化特征表明,YH6T代表γ變形菌綱,交替單胞菌目的一個新屬。建議命名為象牙白運動單胞菌(Motilimonaseburneagen.nov.,sp.nov.),模式菌株為 YH6T(=KCTC 42594T=MCCC 1H00122T)。017T是以中國海南省陵水縣海岸的芋根江蘺為材料,分離得到的一株新的兼性厭氧菌,呈桿狀,革蘭氏陰性。對017T16SrDNA進行分析顯示,017T與Teredinibacter turnerae T7902T相似性最高,為94.4%。017T主要極性脂為磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、氨磷脂及一些其它未知脂類。主要脂肪酸(10%)為C16:0、C18:1ω7c、summed feature 3(C16:1 ω7c/iso-C15:02-OH),含有唯一呼吸醌 Q-8。017T的G+C含量為40.2 mol%。16S rDNA序列分析及生理生化特征表明017T是纖維弧菌目,纖維孤菌科的新屬。命名為居紅藻裂解瓊膠菌(Agarilytica rhodophyticola gen.nov.,sp.nov.),模式菌株為 017T(=KCTC 42584T =MCCC 1H00123 T)。菌株WDS2A16aT是從文登鹽場分離得到的一株革蘭氏陰性菌。WDS2A16aT的極性脂組分包括2種未知的磷脂(phospholipid,PL)、2種未知的氨基脂(Aminolipid,AL)和 5 種未知的脂質(zhì)(lipid,L)。WDS2A16aT 的 DNAG+C含量為47.8 mol%。對16SrRNA基因序列(1457 nt)進行比對分析表明與WDS2A16aT 最為相近的菌株為 Methylobacter marinus(90.61%)。WDS2A16aT代表γ變形菌綱的一個新屬將其命名為鹽場喜鹽菌(Salinibius halmophila gen.nov.,sp.nov.)。模式菌株為 WDS2A16aT(=KCTC 52225T=MCCC 1H00139T)。菌株E85T是從文登鹽場沉積物中分離到的一株革蘭氏陰性菌。對16SrRNA基因序列(1461nt)進行比對分析表明與E85T最為相近的菌株為Spiribacter salinus(97.26%)。E85T的16SrDNA與鄰近菌株的相似度都低于98%,而且發(fā)育樹顯示E85T形成了一個獨立的分枝。綜合表型、分子進化分析、生理生化分析結(jié)果,認為E85T代表一個新的物種,并建議將其命名為喜鹽螺旋桿菌(Spiribacter halobium sp.nov.),模式菌株為 E85T。
[Abstract]:The problem of obesity is becoming more and more serious , threatening human health . It is expected that probiotics will be used to alleviate obesity . The probiotic bacteria used are lactic acid bacteria , and more probiotic bacteria are used for screening . In addition , there are many potential new bacteria in the ocean . In addition , there are many potential new bacteria in the ocean . This paper studies the multi - phase classification of four marine new bacteria and enriches the microbial resources . The results showed that ML182 ( Olleya marilimosa ) isolated from oyster viscera could reduce the fat accumulation in vivo . The polar lipid component is phosphatidylcholine , phosphatidylcholine , cardioid , and other unknown lipids ( phospholipids , lipids , and phosphoramidates ) . The results showed that the main fatty acids ( 10 % ) and Teredinibacter turnerae T7902T had the highest similarity . The results showed that the main fatty acids ( 10 % ) were C C16 : 0 , C18 : 1 蠅7c , sp . nov . The main fatty acids ( 10 % ) were isolated from the genus Pseudoalteromonas citrea ( 92.20 % ) . Strain WDS2A16aT is a Gram - negative bacterium isolated from Wendeng salt farm . The polar lipid component of WDS2A16aT includes two unknown phospholipids ( PL ) , two unknown amino esters ( Aminolipid , AL ) and five unknown lipid ( L ) . WDS2A16aT 鐨，

本文編號：1699710