本文選題：枯草芽胞桿菌　切入點：順丙烯磷酸　出處：《生物工程學(xué)報》2013年06期

【摘要】：旨在用蛋白質(zhì)組學(xué)方法揭示枯草芽胞桿菌Bacillus subtilis 168將順丙烯磷酸轉(zhuǎn)化成磷霉素的機理。B.subtilis 168能夠?qū)㈨槺┝姿岵粚ΨQ轉(zhuǎn)化成磷霉素。氣相色譜分析發(fā)現(xiàn)在轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基發(fā)酵液中的磷霉素的含量達(dá)816.6μg/mL,轉(zhuǎn)化率為36.05%。將分別培養(yǎng)在含有底物和不含底物的培養(yǎng)基中的B.subtilis 168的胞質(zhì)蛋白進(jìn)行雙向凝膠電泳。對兩種條件下的電泳圖譜進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)有98個差異表達(dá)蛋白。其中在有底物存在時,表達(dá)量下調(diào)的點有20個,表達(dá)量上調(diào)的點52個,底物特異性表達(dá)的點有26個。對差異表達(dá)蛋白進(jìn)行質(zhì)譜鑒定,共鑒定到80個蛋白點,其中下調(diào)的點17個,上調(diào)的點45個,底物特異性表達(dá)的點18個。這些蛋白分別參與脅迫反應(yīng)、氧化還原反應(yīng)、物質(zhì)轉(zhuǎn)運、核苷酸代謝、糖代謝、氨基酸和蛋白質(zhì)代謝等。根據(jù)上述對B.subtilis 168蛋白質(zhì)組學(xué)分析結(jié)果,推測菌株是通過兩步將順丙烯磷酸轉(zhuǎn)化成磷霉素的。第一步是水化反應(yīng),第二步是脫氫反應(yīng)。
[Abstract]:The aim of this study was to reveal the mechanism of conversion of cispropene phosphoric acid to fosfomycin by Bacillus subtilis Bacillus subtilis 168 by proteomics. B. subtilis 168 was able to convert propene phosphoric acid asymmetrically to phosphomycin. The content of fosfomycin in fermentation broth was 816.6 渭 g / mL and the conversion rate was 36.05.The cytoplasmic proteins of B.subtilis 168 cultured in medium containing substrate and without substrate were analyzed by two-dimensional gel electrophoresis. 98 differentially expressed proteins were found, of which 20 were down-regulated, 52 were up-regulated and 26 were substrate-specific. Differential expression proteins were identified by mass spectrometry. A total of 80 protein spots were identified, of which 17 were down-regulated, 45 up-regulated and 18 substrate-specific. These proteins were involved in stress response, redox reaction, substance transport, nucleotide metabolism and glucose metabolism, respectively. Amino acid and protein metabolism, etc. According to the results of proteomic analysis of B.subtilis 168, it is speculated that the strain transformed cispropene phosphoric acid into phosphomycin through two steps. The first step is hydration reaction, the second step is dehydrogenation reaction.
【作者單位】： 中國科學(xué)院微生物研究所
【基金】：中國科學(xué)院知識創(chuàng)新工程重要方向項目(No.KSCX2-YW-G-051)資助~~
【分類號】：R37

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