發(fā)布時(shí)間：2018-03-22 16:20

  本文選題：小干擾RNA　切入點(diǎn)：糖基化終產(chǎn)物受體　出處：《醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào)》2013年05期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：目的晚期糖基化終產(chǎn)物受體(the receptor of advanced glycation end products,RAGE)特異性小干擾RNA(small in-terfering RNA,siRNA)能在肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cell,HSCs)T6內(nèi)抑制RAGE、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alpha-smooth muscle ac-tin,α-SMA)和Ⅰ型膠原mRNA和蛋白的表達(dá),其在HSCs的激活和膠原的形成中發(fā)揮著重要的作用。探討RAGE特異性siRNA在原代大鼠HSCs中對(duì)致纖維化細(xì)胞因子生成的影響。方法構(gòu)建RAGE特異性siRNA表達(dá)載體,分離培養(yǎng)原代大鼠HSCs,將重組載體轉(zhuǎn)染入原代大鼠HSCs,以空白組和轉(zhuǎn)染非特異性siRNA表達(dá)載體pAKD-NC組為對(duì)照,分別用PCR法和Western blot檢測(cè)各組原代HSCs RAGE、β1轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(connective tissuegrowth factor,CTGF)mRNA及蛋白的表達(dá)。結(jié)果轉(zhuǎn)染特異性siRNA表達(dá)載體pAKD-GR126的原代HSCs RAGE mRNA和相對(duì)分子質(zhì)量為42000的RAGE蛋白的表達(dá)分別為空白組和pAKD-NC組的(42.32±6.16)%、(43.24±7.50)%和(51.06±13.79)%、(47.94±5.36)%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同時(shí)TGF-β1 mRNA和蛋白的表達(dá)率分別占空白組和pAKD-NC組的(43.72±0.76)%、(44.75±3.78)%和(45.35±2.03)%、(47.71±3.32)%(P0.05),CTGF mRNA和蛋白的表達(dá)分別是空白組和pAKD-NC組的(39.32±7.22)%、(39.50±4.58)%和(42.58±5.95)%、(43.74±2.16)%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 RAGE特異性siRNA可抑制原代大鼠HSCs RAGE基因的表達(dá),并能有效抑制致纖維化細(xì)胞因子的生成。
[Abstract]:Objective the late glycosylation end product receptor, the receptor of advanced glycation end products (RAGEG), can inhibit the expression of RAGE, 偽 -smooth muscle actin alpha-smooth muscle ac-tinin (偽 -SMA) and type I collagen mRNA and protein in hepatic stellate cells in hepatic stellate cells. It plays an important role in the activation of HSCs and the formation of collagen. To investigate the effect of RAGE specific siRNA on the production of fibrogenic cytokines in primary rat HSCs, the expression vector of RAGE specific siRNA was constructed. Primary rat HSCs were isolated and cultured, and the recombinant vector was transfected into primary rat HSCs. The control group was blank group and non-specific siRNA expression vector pAKD-NC group. PCR and Western blot were used to detect the expression of HSCs RAGE- 尾 1 transforming growth factor- 尾 1 (TGF- 尾 1) and connective tissuegrowth factor-CTGF- 尾 1 (CTGF- 尾 1) respectively. Results the HSCs RAGE mRNA and relative molecular weight of pAKD-GR126 were transfected with siRNA expression vector pAKD-GR126. The expression of 42000 RAGE protein was 42.32 鹵6.16% in blank group and 43.24 鹵7.50% in pAKD-NC group, respectively, and 51.06 鹵13.7990 鹵5.36% in pAKD-NC group, the difference was statistically significant (P 0.05). Meanwhile, the expression rates of TGF- 尾 1 mRNA and protein in blank group and pAKD-NC group were 43.72 鹵0.76 鹵3.78% and 45.35 鹵2.0335 鹵2.035%, respectively. The expression rates of CTGF mRNA and protein in pAKD-NC group were 47.71 鹵3.0310% and 47.71 鹵3.03% respectively in blank group and pAKD-NC group, which were the same as that in control group and pAKD-NC group (43.72 鹵3.78% and 45.35 鹵2.0335 鹵2.03g), respectively. The expression rates of TGF- 尾 _ 1 mRNA and protein were 43.72 鹵3.78% and 45.35 鹵2.03% in blank group and pAKD-NC group, respectively. 39.32 鹵7.22% and 42.58 鹵5.95% and 43.74 鹵2.16%, respectively. Conclusion RAGE specific siRNA can inhibit the expression of HSCs RAGE gene in primary rat. And can effectively inhibit the production of fibrogenic cytokines.
【作者單位】： 東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院消化內(nèi)科;
【基金】：江蘇省自然科學(xué)基金(BK2009284)
【分類(lèi)號(hào)】：R363

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本文編號(hào)：1649428