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幽門螺桿菌外膜蛋白Omp18表達載體構(gòu)建及其多克隆抗體的制備

發(fā)布時間:2018-03-18 02:20

  本文選題:幽門螺桿菌 切入點:Omp 出處:《中國病原生物學(xué)雜志》2013年07期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的制備幽門螺桿菌的外膜蛋白Omp18及其多克隆抗體。方法設(shè)計Omp18基因引物,PCR擴增Omp18基因,將其連入pMD-18T載體,再克隆入原核表達載體pTriEx(TM)-4,重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸埃希菌JM109DE,IPTG誘導(dǎo)表達Omp18蛋白,純化后免疫家兔,以獲得多克隆抗體。結(jié)果 PCR擴增的Omp18基因成功克隆入原核表達載體,重組原核表達載體轉(zhuǎn)化菌表達Omp18蛋白,純化的Omp18蛋白免疫動物后血清中獲得多克隆抗體。結(jié)論本實驗成功進行了Omp18蛋白的原核細胞表達并制備了多克隆抗體,為研究Omp18的功能、表達調(diào)控以及幽門螺桿菌檢測和疫苗生產(chǎn)等奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to study the preparation of outer membrane protein Omp18 of Helicobacter pylori and its polyclonal antibody. The design method of Omp18 gene primers, PCR amplification of the Omp18 gene, which will be connected to pMD-18T vector and then cloned into the prokaryotic expression vector pTriEx (TM) -4. The recombinant plasmid was transformed into Escherichia coli JM109DE, IPTG induced expression of Omp18 protein, immunization of rabbits after purification and in order to obtain polyclonal antibody. The Omp18 gene was amplified by PCR was cloned into the prokaryotic expression vector, Recombinant Prokaryotic Expression Vector transformed bacteria Omp18 protein expression, polyclonal antibody was purified animal immune serum Omp18 protein. Conclusion after the success of the polyclonal antibody preparation of Omp18 protein expression in prokaryotic cells then, to study the function of Omp18, laid the foundation for regulation and expression of Helicobacter pylori detection and vaccine production.

【作者單位】: 泰山醫(yī)學(xué)院病原學(xué)教研室/病原學(xué)研究所;山東省泰山療養(yǎng)院內(nèi)科;泰山醫(yī)學(xué)院環(huán)境工程教研室;
【基金】:山東省自然科學(xué)基金項目(No.ZR2009CM028,ZR2009CQ003,ZR2012CQ035) 山東省高等學(xué)校科技計劃項目(No.J11LF12,J10LF04) 山東省醫(yī)藥科技發(fā)展計劃項目(No.2009HZ098) 泰山醫(yī)學(xué)院科研項目(No.2012GCC01)
【分類號】:R378

【參考文獻】

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【二級參考文獻】

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2 陳潔;陳e,

本文編號:1627563


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