發(fā)布時間：2018-03-01 14:21

  本文關(guān)鍵詞： 突觸蛋白Ⅰ 組織型纖溶酶原激活物 神經(jīng)肌肉接頭 推拿 坐骨神經(jīng)損傷　出處：《北京中醫(yī)藥大學(xué)》2015年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：[目的] 觀察推拿治療對坐骨神經(jīng)損傷大鼠行為學(xué)的改變,探索突觸蛋白Ⅰ(Synapsin Ⅰ)、纖溶酶原激活物(tPA)及其抑制劑(PAI-1)、乙酰膽堿受體(nAChR)與相關(guān)誘導(dǎo)因子分別在脊髓、坐骨神經(jīng)損傷點(diǎn)遠(yuǎn)端與神經(jīng)肌肉接頭(NMJ)中表達(dá)的變化,從突觸可塑性角度探究推拿對周圍神經(jīng)損傷運(yùn)動功能影響的機(jī)理。[方法] 將成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組、模型組、模型對照組及推拿組。選用坐骨神經(jīng)神經(jīng)夾持損傷模型對模型組、模型對照組與推拿組大鼠實(shí)施手術(shù)造模。行為學(xué)以SFI與BBB評分考察運(yùn)動功能恢復(fù)情況；通過實(shí)時熒光定量、免疫印跡法、免疫組織化學(xué)法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測脊髓腹角、損傷點(diǎn)遠(yuǎn)端與NMJ中相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)情況,分析造模手術(shù)與推拿治療對各指標(biāo)的影響。[結(jié)果]1行為學(xué)SFI：造模三組大鼠在造模后7d的SFI顯著低于正常組(p0.05),表明造模成功。治療5次后,模型組、模型對照組與推拿組的SFI均顯著低于正常組(p0.05)。推拿組大鼠SFI較模型組、模型對照組有所升高,但不具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。治療10次后,造模的三組大鼠評分均低于正常組,有顯著差異(p0.05),推拿組SFI均值較模型組出現(xiàn)顯著上升(p0.05)。治療15次后,造模的三組大鼠評分均低于正常組,有顯著差異(p0.05)；推拿組的結(jié)果與治療10次后結(jié)果相近,高于模型組、模型對照組(p0.05),低于正常組(p0.05)。在10-20次治療過程中,模型組與模型對照組的SFI評分有上升趨勢。治療20次后,推拿組SFI顯著高于模型組(p0.05),低于正常組但無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。BBB評分：造模三組大鼠術(shù)后7d的BBB結(jié)果與正常組相比顯著降低(p0.05),提示模型制作成功。治療5次后,造模三組BBB評分均顯著低于正常組(p0.05)。推拿組大鼠BBB結(jié)果較模型組、模型對照組有所升高,不具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。治療10次后,造模三組的結(jié)果均顯著低于正常組(p0.05),推拿組BBB均值較模型組出現(xiàn)顯著上升(p0.05)。治療15次后,造模三組的評分低于正常組(p0.05),略有上升；推拿組的BBB評分顯著高于模型組(p0.05)。治療20次后,模型組與模型對照組的評分上升,但與正常組存在差異(p0.05)；推拿組BBB評分上升至19.13±1.36,顯著高于模型組(p0.05),低于正常組(p0.05)。行為學(xué)結(jié)果共同表明20次推拿治療量累積可明顯改善坐骨神經(jīng)損傷大鼠的運(yùn)動功能,但未使受損神經(jīng)恢復(fù)至正常。2 Synapsin Ⅰ轉(zhuǎn)錄與p-Synapsin Ⅰ蛋白表達(dá)造模大鼠術(shù)后7d的Synapsin I轉(zhuǎn)錄、p-Synapsin I蛋白表達(dá)與正常組相比顯著降低(p0.05)。治療20次后,推拿組Synapsin Ⅰ轉(zhuǎn)錄顯著高于模型組(p0.05),也高于正常組,但沒有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)；同時推拿組p-SynapsinⅠ蛋白表達(dá)顯著高于模型組(p0.05)、低于正常組(p0.05)。結(jié)果表明推拿干預(yù)提高脊髓腹角Synapsin Ⅰ基因轉(zhuǎn)錄及其磷酸化蛋白的表達(dá),促進(jìn)運(yùn)動神經(jīng)元的神經(jīng)遞質(zhì)釋放。3 tPA與PAI-1的蛋白表達(dá)造模后7d模型組大鼠損傷點(diǎn)遠(yuǎn)端的tPA、PAI-1平均積分光密度高于正常組(p0.05)；治療20次后模型組、模型對照組tPA平均積分光密度值有下降趨勢,仍高于正常組(p0.05),而PAI-1平均積分光密度值繼續(xù)升高,顯著高于正常組(p0.05)。經(jīng)過20次推拿治療后,推拿組tPA與PAI-1表達(dá)均顯著低于模型組(p0.05),略高于正常組,無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。結(jié)果顯示推拿治療縮短tPA與PAI-1在細(xì)胞外基質(zhì)中高表達(dá)的病理過程,加快纖維蛋白沉積的溶解,為突觸重塑創(chuàng)造良好微環(huán)境。4 NMJ受體與神經(jīng)誘導(dǎo)因子的轉(zhuǎn)錄與蛋白表達(dá)與正常組相比,造模后7d模型組大鼠γ-nAChR mRNA轉(zhuǎn)錄顯著增強(qiáng)(p0.05),ε-nAChR mRNA轉(zhuǎn)錄水平下降(p0.05)；治療20次后,模型組與模型對照組γ-nAChR mRNA保持平穩(wěn)、ε-nAChR mRNA的表達(dá)升高,低于正常組(p0.05)。推拿組γ-nAChR mRNA轉(zhuǎn)錄低于模型組(p0.05), ε-nAChR mRNA轉(zhuǎn)錄高于模型組(p0.05)。造模后7d模型組大鼠Agrin、MuSK基因轉(zhuǎn)錄與MuSK蛋白表達(dá)低于正常組(p0.05)。治療20次后,模型組、模型對照組Agrin與MuSK基因轉(zhuǎn)錄、MuSK蛋白表達(dá)低于正常組(p0.05)；推拿組Agrin與MuSK基因轉(zhuǎn)錄顯著高于模型組(p0.05)、低于正常組(p0.05),MuSK蛋白表達(dá)顯著高于模型組與正常組(p0.05)。結(jié)果共同表明推拿提高Agrin與MuSK基因轉(zhuǎn)錄與MuSK蛋白表達(dá)水平,對γ-ε亞基轉(zhuǎn)換發(fā)揮積極作用,促進(jìn)失神經(jīng)支配肌肉的再支配。[結(jié)論]1推拿可以顯著改善坐骨神經(jīng)損傷大鼠的運(yùn)動功能。2推拿增強(qiáng)坐骨神經(jīng)損傷大鼠脊髓中Synapsin Ⅰ基因的轉(zhuǎn)錄與p-Synapsin Ⅰ蛋白的表達(dá),進(jìn)而加強(qiáng)脊髓中運(yùn)動神經(jīng)元與靶器官建立聯(lián)系。3推拿調(diào)節(jié)損傷點(diǎn)遠(yuǎn)端tPA與PAI-1的穩(wěn)態(tài),維持微環(huán)境修復(fù)能力趨近正常狀態(tài),預(yù)防和解除膠原纖維形成結(jié)締組織瘢痕,為突觸重塑提供良好的微環(huán)境。4推拿對Agrin/MuSK信號通路中誘導(dǎo)因子表達(dá)的升高可能進(jìn)一步促進(jìn)NMJ發(fā)育中γ-ε的亞基置換,促進(jìn)失神經(jīng)肌肉的再支配,提高突觸的傳遞效率。
[Abstract]:[Objective] to observe the massage treatment of sciatic nerve injury rat behavior change, explore the synaptic protein I (Synapsin I), plasminogen activator (tPA) and its inhibitor (PAI-1), acetylcholine receptor (nAChR) and the related factors were induced in spinal cord injury of sciatic nerve distal and neuromuscular junction (NMJ) the changes of expression mechanism.] method to explore the effect of massage on sports injury of peripheral nerve function from the angle of synaptic plasticity in adult male SD rats were randomly divided into normal group, sham operation group, model group, control group and model group. The push with sciatic nerve clamping injury model in the model group, model the control group and massage group rats operation model. The behavior in SFI and BBB scores of motor function recovery; through real time PCR, immunoblotting, immunohistochemistry and enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of spinal cord 鑵硅,鎹熶激鐐硅繙绔笌NMJ涓浉鍏蟲寚鏍囩殑琛ㄨ揪鎯呭喌,鍒嗘瀽閫犳ā鎵嬫湳涓庢帹鎷挎不鐤楀鍚勬寚鏍囩殑褰卞搷.[緇撴灉]1琛屼負(fù)瀛FI錛氶，

本文編號：1552311