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大鼠大腦皮層神經干細胞培養(yǎng)方法比較

發(fā)布時間:2018-03-01 03:28

  本文關鍵詞: SD大鼠 大腦皮層 神經干細胞 培養(yǎng)方法 出處:《神經解剖學雜志》2013年01期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的:比較不同培養(yǎng)基對大腦皮層神經干細胞增殖的影響,以尋找培養(yǎng)神經干細胞的有效方法。方法:體外分離生后24 h SD大鼠大腦皮層細胞,使用DMEM/F12+B27+bFGF、Neurobasal+B27+bFGF和Neuro-basal+B27三種培養(yǎng)條件,分別用懸浮培養(yǎng)法和貼壁培養(yǎng)法對細胞進行培養(yǎng)。免疫細胞化學技術分別以Nestin、β-TubIII和GFAP標記神經干細胞、神經元和星形膠質細胞。結果:在懸浮培養(yǎng)情況下,三種培養(yǎng)條件均誘導所培養(yǎng)的細胞形成神經球,經染色鑒定神經球中的細胞均表達Nestin;其中DMEM/F12+B27+bFGF培養(yǎng)的神經干細胞增殖速度最快(P0.01),Neurobasal+B27培養(yǎng)的神經干細胞增殖效率最高(P0.01)。在貼壁培養(yǎng)情況下,經染色鑒定,部分細胞表達β-TubⅢ或GFAP。結論:大腦皮層神經干細胞不適合貼壁培養(yǎng),DMEM/F12+B27+bFGF條件適合大腦皮層神經干細胞體外增殖。
[Abstract]:Objective: to compare the effects of different culture media on the proliferation of neural stem cells (NSCs) in cerebral cortex, and to find an effective way to culture NSCs. Methods: the cortical cells of SD rats were isolated 24 hours after birth in vitro. DMEM/F12 B27 bFGFG Neurobasal B27 bFGF and Neuro-basal B27 were used to culture the cells by suspension culture and adherent culture respectively. Nestin, 尾 -TubIII and GFAP were used to label Nestin, 尾 -TubIII and GFAP by immunocytochemistry, respectively. Results: under the condition of suspension culture, the cultured cells were induced to form neurospheres. Nestin was detected by staining, and the proliferation rate of neural stem cells cultured with DMEM/F12 B27 bFGF was the fastest. The proliferation efficiency of neural stem cells cultured in neurobasal B27 was the highest (P 0.01). Under the condition of adherent culture, the proliferation rate of neural stem cells was identified by staining. Conclusion: the neural stem cells of cerebral cortex are not suitable for the proliferation of neural stem cells in vitro under the condition of DMEM / F12B27 bFGF.
【作者單位】: 上海體育學院運動科學院;
【基金】:國家自然科學基金(30870349) 運動健身科技省部共建教育部重點實驗室基金(上海體育學院)
【分類號】:R329

【參考文獻】

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本文編號:1550217


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