發(fā)布時間：2018-02-21 09:26

  本文關(guān)鍵詞： 過敏性哮喘 豚鼠 穴位埋線 細(xì)胞因子 黏附分子　出處：《廣州中醫(yī)藥大學(xué)》2015年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究目的：本實(shí)驗(yàn)采用卵蛋白致敏法建立過敏性哮喘豚鼠模型,以過敏性哮喘豚鼠為研究對象,觀察穴位埋線對過敏性哮喘豚鼠的治療效應(yīng)及肺、支氣管組織病理學(xué)變化,運(yùn)用HE染色和免疫組織化學(xué)方法,觀察肺部組織炎癥細(xì)胞及其細(xì)胞分類,分析穴位埋線對肺組織細(xì)胞因子IL-21及IL-21R、黏附分子ICAM-1及VCAM-1表達(dá)的影響,深入探討穴位埋線對過敏性哮喘的治療效應(yīng)及其作用機(jī)制,為穴位埋線防治過敏性哮喘提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究方法：健康豚鼠40只,雌雄各半,體重約230-280g,將所有豚鼠于安靜環(huán)境中適應(yīng)性喂養(yǎng)3日后,隨機(jī)分為：空白組、模型組、穴位埋線組、地塞米松組,每組10只。采用卵蛋白腹腔注射致敏后呼吸道吸入激發(fā)法制備哮喘豚鼠模型。除開空白組不作任何干預(yù)外,其余各組均進(jìn)行過敏性哮喘豚鼠造模。第1天用10%的卵蛋白溶液lml進(jìn)行腹腔注射致敏,然后從第15天開始用1%的卵蛋白溶液進(jìn)行霧化吸入20min,每天1次,連續(xù)兩周,直至各豚鼠出現(xiàn)嗆咳,躁動,呼吸頻率加速,幅度加大,腹肌痙攣等癥狀則提示造模成功。空白組：不予任何處理,至第30天開始予蒸餾水2m1/只灌胃。模型組：制備哮喘氣道重建模型,使大鼠處于致敏狀態(tài)14d。自第15天起開始霧化吸入1%卵蛋白生理鹽水溶液以激發(fā)哮喘,隔日1次,每次激發(fā)時間為20 min。穴位埋線組：造模豚鼠發(fā)作后第二天進(jìn)行穴位埋線,每次干預(yù)均在霧化前30mmin進(jìn)行。埋線穴位選取大杼、風(fēng)門、肺俞,8號注射針頭和2寸一次性針灸針組成埋線針,注射針頭垂直刺入穴位下深度0.5 cm,邊退針邊用針灸針將羊腸線推入穴位中。7天1次,風(fēng)門和肺俞穴位左右交替,治療3次后處死豚鼠,取材檢驗(yàn)。地塞米松組：每次霧化前30min給予地塞米松0.5 mg/kg腹腔注射,其余均同模型組。治療結(jié)束后,處死豚鼠,行HE染色及免疫組織化學(xué)檢測。所有數(shù)據(jù)均以x±s表示,采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù),進(jìn)行單因素方差分析,兩組比較方差齊性時采用LSD法,方差不齊時采用Dunnett T3法,P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。研究結(jié)果：1.肺部組織方面,正常對照組豚鼠支氣管上皮完整,無明顯炎癥反應(yīng),肺組織亦正常。哮喘豚鼠支氣管及血管周圍可見大量炎性細(xì)胞浸潤,以嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞為主,肺間質(zhì)亦可見到嗜酸性粒細(xì)胞浸潤。粘膜下層增厚,粘膜皺襞增多,管腔可見狹窄。穴位埋線組及地塞米松組豚鼠經(jīng)過各自干預(yù)后,支氣管及肺間質(zhì)的炎性細(xì)胞浸潤明顯減輕,粘膜下層增厚不明顯。2.炎癥細(xì)胞方面,模型組、穴位埋線組、地塞米松組炎癥細(xì)胞總數(shù)均多于正常對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；與模型組比較,穴位埋線組和地塞米松組炎癥細(xì)胞總數(shù)均減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),其中Eos為三種炎癥細(xì)胞中最少的,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(與Lym、Neu比較,P0.05)；而模型組中,Eos為三種炎癥細(xì)胞中最多的,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(與Lym、Neu比較,P0.05),穴位埋線組和地塞米松組均能使Eos數(shù)目減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)果提示過敏性哮喘個體肺組織中存在以Eos為主的炎癥細(xì)胞浸潤,而穴位埋線及地塞米松可明顯緩解這種狀況。3.細(xì)胞因子方面,模型組中IL-21蛋白和IL-21R蛋白的平均光密度值和陽性面積率遠(yuǎn)高于正常組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。地塞米松組和穴位埋線組分別與模型組比較,IL-21蛋白和IL-21R的平均光密度值和陽性面積率明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),且穴位埋線組與地塞米松組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。結(jié)果提示,經(jīng)治療后,地塞米松和穴位埋線能減少IL-21蛋白和IL-21R蛋白的表達(dá),而穴位埋線在減少相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)方面不及地塞米松作用強(qiáng)。4.黏附分子方面,模型組中ICAM-1和VCAM-1的平均光密度值和陽性面積率明顯高于正常組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。地塞米松組和穴位埋線組分別和模型組比較,ICAM-1和VCAM-1的平均光密度值和陽性面積率均明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),且穴位埋線組與地塞米松組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),結(jié)果提示,經(jīng)治療后,地塞米松和穴位埋線能減少黏附分子ICAM-1和VCAM-1的表達(dá),但穴位埋線在減少相關(guān)黏附分子方面不及地塞米松作用強(qiáng)。研究結(jié)論：1.過敏性哮喘會影響豚鼠的肺部組織,引起相關(guān)病理反應(yīng),出現(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤以及支氣管粘膜下層增厚,粘膜皺襞增多,管腔狹窄,而穴位埋線及地塞米松均能緩解過敏性哮喘豚鼠肺部組織的病理表現(xiàn)。并且地塞米松及穴位埋線均能減少炎癥細(xì)胞在哮喘豚鼠肺部組織的浸潤及肺部組織的改變,從而緩解過敏性哮喘對肺部組織的造成的病理改變。2.過敏性哮喘導(dǎo)致的炎性細(xì)胞浸潤中,以嗜酸性粒細(xì)胞增多為主,穴位埋線及地塞米松均能有效減少嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)目,地塞米松組與穴位埋線組作用相當(dāng)。地塞米松及穴位埋線均對過敏性哮喘有治療作用。3.對于過敏性哮喘導(dǎo)致的相關(guān)細(xì)胞因子、黏附分子表達(dá)增多,促進(jìn)肺部炎癥反應(yīng),穴位埋線及地塞米松均有治療效應(yīng),能減少相關(guān)細(xì)胞因子、黏附分子的表達(dá),且地塞米松組療效好于穴位埋線組。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R245;R-332

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