人類組織中TRAF3IP3基因表達(dá)的檢測及轉(zhuǎn)染胚腎HEK293細(xì)胞后的亞細(xì)胞定位
本文關(guān)鍵詞: TRAFIP 組織表達(dá)譜 亞細(xì)胞定位 出處:《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》2013年14期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的克隆TRAF3IP3基因,明確TRAF3IP3在部分人類組織中的表達(dá)譜并鑒定其表達(dá)產(chǎn)物的亞細(xì)胞定位。方法采用實時定量PCR檢測TRAF3IP3基因在人體各組織中的表達(dá)情況;克隆TRAF3IP3基因開放讀碼框區(qū)(ORF)并構(gòu)建真核亞細(xì)胞定位質(zhì)粒。轉(zhuǎn)染人胚腎HEK 293細(xì)胞,激光共聚焦顯微鏡觀察融合蛋白的亞細(xì)胞定位。結(jié)果實時定量PCR證實TRAF3IP3基因在被檢測的11種組織中均有表達(dá),其中在淋巴結(jié)、脾、骨髓、胃和睪丸中的表達(dá)水平較高;成功克隆了TRAF3IP3基因ORF區(qū)并構(gòu)建成為熒光定位質(zhì)粒,激光共聚焦顯微鏡觀察證實TRAF3IP3蛋白主要定位于核膜,在核周呈顆粒狀分布。結(jié)論 TRAF3IP3基因在淋巴細(xì)胞富集的器官呈高表達(dá),可能參與免疫系統(tǒng)的發(fā)育、成熟及調(diào)控,其表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)主要定位于核膜及核周胞漿。
[Abstract]:Objective to clone TRAF3IP3 gene. The expression profile of TRAF3IP3 in some human tissues and the subcellular localization of its expression product were identified. Methods Real-time quantitative PCR was used to detect the expression of TRAF3IP3 gene in human tissues. The situation; TRAF3IP3 gene was cloned and the eukaryotic subcellular localization plasmid was constructed. The plasmid was transfected into human embryonic kidney HEK 293 cells. Results Real-time quantitative PCR confirmed the expression of TRAF3IP3 gene in 11 tissues, including lymph nodes, spleen and bone marrow. The expression level was higher in stomach and testis. The ORF region of TRAF3IP3 gene was cloned and constructed into fluorescent localization plasmid. Laser confocal microscopy showed that TRAF3IP3 protein was mainly located in nuclear membrane. Conclusion TRAF3IP3 gene is highly expressed in the organs enriched with lymphocytes, which may be involved in the development, maturation and regulation of the immune system. The expression products were mainly located in nuclear membrane and perinuclear cytoplasm.
【作者單位】: 河北聯(lián)合大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院病理科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81072093)~~
【分類號】:R341
【正文快照】: TRAF3IP3(TRAF3 interacting protein 3)是2003年發(fā)現(xiàn)的一個人類基因,又被稱作T3JAM[TRAF3-inter-acting Jun N-terminal kinase(JNK)-activating modula-tor]。該基因編碼產(chǎn)物特異性地與TRAF3(TNF recep-tor-associated factor 3)蛋白相互作用,募集TRAF3形成垢劑不溶的復(fù)合物
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