本文關(guān)鍵詞： 兔免疫球蛋白 熒光微球 液相懸浮芯片 優(yōu)化　出處：《中國免疫學(xué)雜志》2013年09期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:制備兔的免疫球蛋白液相懸浮芯片并對(duì)其制備條件進(jìn)行優(yōu)化,為進(jìn)一步建立兔免疫球蛋白液相懸浮芯片檢測(cè)技術(shù)提供基礎(chǔ)。方法:分別將親和純化的兔IgG、IgM和IgA偶聯(lián)至熒光編碼微球,然后優(yōu)化捕獲抗體的偶聯(lián)量、檢測(cè)抗體、Streptavidin-PE抗體的最佳工作濃度以及微球-血清反應(yīng)時(shí)間、檢測(cè)抗體反應(yīng)時(shí)間和Streptavidin-PE抗體反應(yīng)時(shí)間等因素,建立兔IgG、IgM和IgA液相懸浮芯片。結(jié)果:1.25×106個(gè)熒光微球的最佳偶聯(lián)抗體濃度分別為10μg IgG、20μg IgM和15μg IgA;biotin標(biāo)記的IgG、IgM和IgA檢測(cè)抗體最佳工作濃度分別為2、2和5μg/ml;IgG、IgM和IgA的最佳Streptavidin-PE抗體濃度均為2μg/ml;微球-血清、血清-檢測(cè)抗體及Streptavidin-PE抗體最佳反應(yīng)時(shí)間分別為60、60和30分鐘。結(jié)論:制備熒光編碼微球兔免疫球蛋白懸浮芯片是可行的方法。
[Abstract]:Objective: to prepare rabbit immunoglobulin liquid suspension microarray and optimize its preparation conditions. Methods: rabbit immunoglobulin IgM and IgA were conjugated to fluorescent coded microspheres respectively. The optimal working concentration of Streptavidin-PE antibody and the reaction time of microspheres and serum were determined. The factors of antibody reaction time and Streptavidin-PE antibody reaction time were determined to establish rabbit IgG. IgM and IgA liquid suspension microarrays. Results the optimal concentration of 10 渭 g IgG IgM and 15 渭 g IgA were 20 渭 g IgM and 15 渭 g IgA of 10 渭 g IgGN 20 渭 g IgM and 15 渭 g IgA, respectively. The best working concentration of biotin labeled IgG biotin IgM and IgA was 2 渭 g / ml and 5 渭 g / ml, respectively. The best concentration of Streptavidin-PE antibody for IgG IgA was 2 渭 g / ml. The optimum reaction time of microsphere and serum, serum-detection antibody and Streptavidin-PE antibody was 60, respectively. Conclusion: it is feasible to prepare a fluorescent coded microsphere rabbit immunoglobulin suspension chip.
【作者單位】： 浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心/比較醫(yī)學(xué)研究中心;
【基金】：浙江省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2011C37093) 浙江省教育廳重大科技攻關(guān)項(xiàng)目(ZD2009004) 浙江省衛(wèi)生高層次創(chuàng)新人才培養(yǎng)工程項(xiàng)目
【分類號(hào)】：R392.11
【正文快照】： 液相懸浮芯片技術(shù)是一種新型、高通量的生物芯片技術(shù),將流式細(xì)胞術(shù)、激光技術(shù)及應(yīng)用流體學(xué)等技術(shù)結(jié)合在一起,利用懸浮在液相中的分類熒光編碼微球作為檢測(cè)載體,具有高通量、速度快、靈敏度高、特異性強(qiáng)及檢測(cè)范圍廣等特點(diǎn)。近幾年來,懸浮芯片技術(shù)在免疫學(xué)、基因組學(xué)、蛋白質(zhì)

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本文編號(hào)：1452939