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2型登革病毒通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)EA. hy926細(xì)胞凋亡

發(fā)布時(shí)間:2018-01-04 20:28

  本文關(guān)鍵詞:2型登革病毒通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)EA. hy926細(xì)胞凋亡 出處:《中國(guó)病理生理雜志》2013年03期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:目的:探討登革病毒誘導(dǎo)EA.hy926細(xì)胞(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞融合細(xì)胞株)相對(duì)活力的變化與線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential,Δψm)改變及線粒體凋亡途徑的關(guān)系。方法:用2型登革病毒(denguevirus type 2,DENV-2)感染EA.hy926細(xì)胞,MTT法檢測(cè)感染前后EA.hy926細(xì)胞的相對(duì)活力,熒光顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)分別觀察感染前后JC-1在EA.hy926細(xì)胞線粒體內(nèi)的聚集情況以檢測(cè)Δψm的改變,通過(guò)比色法檢測(cè)caspase-9的活性變化。結(jié)果:DENV-2感染EA·hy926細(xì)胞24 h、36 h及48 h后,細(xì)胞活性受到顯著抑制,550 nm處的A值均低于未感染組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,P0.01);JC-1染色顯示,感染后各時(shí)點(diǎn),代表正常線粒體的紅色熒光均較未感染組減弱,而代表Δψm下降的綠色熒光較未感染組逐漸增強(qiáng)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Δψm平均熒光密度比未感染組減低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。DENV-2感染后早期即可出現(xiàn)caspase-9活性的上升,與未感染組相比,各時(shí)點(diǎn)的活性差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:DENV-2感染EA·hy926細(xì)胞后可誘發(fā)Δψm下降,增強(qiáng)caspase-9活性,進(jìn)而啟動(dòng)線粒體的凋亡途徑。
[Abstract]:Objective: To investigate the dengue virus induced EA.hy926 cells (cell line of human umbilical vein endothelial cell fusion) and changes of mitochondrial membrane potential (mitochondrial membrane relative activity of potential, m and delta psi) relationship between the changes of mitochondrial apoptosis pathway. Methods: dengue virus type 2 (denguevirus type 2, DENV-2) infection of EA.hy926 cells, MTT method to detect the infection of EA.hy926 cells before and after the relative activity, fluorescence microscopy and flow cytometry were used to observe the aggregation of JC-1 before and after infection in EA.hy926 cell mitochondria to detect the change of M delta psi, by changing the activity of the caspase-9 colorimetric assay. Results: the infection of DENV-2 EA hy926 cells in 24 h, 36 h and 48 h after the cell activity was inhibited at 550 nm A values were lower than the uninfected group, the difference was statistically significant (P0.05, P0.01); JC-1 staining showed red fluorescence at different time points after infection, on behalf of normal mitochondria were Compared with the uninfected group decreased, and the representative of green fluorescent m decreased compared with delta psi uninfected group increased gradually. The mean fluorescence density of delta psi detection m than the uninfected group. Flow cytometry, differences can occur early caspase-9 activity increased statistical significance after.DENV-2 infection, compared with uninfected group, activity difference at each time point there was statistically significant (P0.01). Conclusion: DENV-2 EA infection, hy926 cells can induce Delta Psi m decreased, increased caspase-9 activity and apoptosis of mitochondrial pathway.

【作者單位】: 中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)研究所教育部熱帶病防治研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.30872350) 廣東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.S2012010009050) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2010B050700008;No.2011B040300022) 廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2011J4100084)
【分類號(hào)】:R373.33
【正文快照】: 登革熱是是世界上最常見(jiàn)的蚊媒傳播疾病之一,但目前仍缺乏合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型和特異性的治療手段,也沒(méi)有安全的疫苗可以預(yù)防其傳播。對(duì)于重癥型的登革出血熱(dengue hemorrhagic fever,DHF)或登革休克綜合征(dengue shock syndrome,DSS),血管內(nèi)皮損傷導(dǎo)致的血漿滲漏及出血是

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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4 李文龍;血管內(nèi)皮細(xì)胞特異表達(dá)Cre重組酶轉(zhuǎn)基因小鼠的建立[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

5 陳宗濤;小鼠抗登革病毒2型單克隆抗體的制備及特性的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

6 鞠遠(yuǎn)榮;柯薩奇B_3病毒對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞骨架、緊密連接和通透性的影響及p38MAPK的調(diào)控作用[D];山東大學(xué);2005年

7 吳潔;基因芯片研究細(xì)胞氧化低密度脂蛋白的可能機(jī)制[D];武漢大學(xué);2005年

8 李東英;登革Ⅱ型病毒E蛋白基因原核及真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建[D];鄭州大學(xué);2006年

9 陳慧;人未受精、受精未分裂卵母細(xì)胞及早期發(fā)育阻滯胚胎的超微結(jié)構(gòu)研究[D];鄭州大學(xué);2007年

10 劉金鐘;血管化組織工程骨的構(gòu)建[D];吉林大學(xué);2008年

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本文編號(hào):1379981

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