發(fā)布時間：2018-01-03 17:27

  本文關(guān)鍵詞：乙型肝炎病毒X蛋白抑制SFRP5啟動子的活性　出處：《中國病理生理雜志》2013年02期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 乙型肝炎病毒X蛋白 分泌型卷曲相關(guān)蛋白 啟動子區(qū)

【摘要】：目的:探討乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)抑制分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)啟動子活性的分子機(jī)制。方法:擴(kuò)增不同長度的SFRP5啟動子區(qū)片段,構(gòu)建到螢光素酶報告基因載體pGL3-Basic上,并將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入正常肝細(xì)胞系LO2細(xì)胞,再分別感染編碼HBx的腺病毒(Ad-HBx)或編碼綠色熒光蛋白的腺病毒(Ad-GFP),熒光顯微鏡下觀察病毒感染效率,檢測螢光素酶活性以觀察HBx對SFRP5啟動子活性的影響。結(jié)果:(1)含不同長度的SFRP5啟動子區(qū)截短突變報告質(zhì)粒構(gòu)建成功。(2)截短突變報告質(zhì)粒的螢光素酶活性與pGL3-Basic對照組相比,分別為(6.32±0.04)倍(-478 bp～+47 bp)、(5.79±0.32)倍(-811 bp～+47 bp)、(3.59±0.34)倍(-1 235 bp～+47 bp)、(3.86±0.39)倍(-1 677 bp～+47 bp)、(3.26±0.42)倍(-2 072 bp～+47 bp)(均P0.05)。過表達(dá)HBx可以明顯抑制SFRP5啟動子活性,抑制率分別為44%(-478 bp～+47 bp)(P0.05)、46%(-811 bp～+47 bp)(P0.05)、28%(-1 235 bp～+47 bp)、24%(-1 677 bp～+47 bp)和40%(-2 072 bp～+47 bp)。結(jié)論:HBx可以明顯抑制SFRP5啟動子區(qū)活性,可能導(dǎo)致SFRP5基因表達(dá)下調(diào)。
[Abstract]:Objective: to investigate the inhibitory effect of hepatitis B virus X protein (HBX) on secretory crimp associated protein 5 (SFRP5). Methods: SFRP5 promoter fragments of different lengths were amplified. Luciferase reporter gene vector pGL3-Basic was constructed and the constructed recombinant plasmid was transfected into normal liver cell line LO2 cells. Then the adenovirus encoding HBx (Ad-HBx) or the adenovirus encoding green fluorescent protein (Ad-GFPX) were infected respectively. The infection efficiency was observed under fluorescence microscope. Luciferase activity was detected to observe the effect of HBx on the activity of SFRP5 promoter. The luciferase activity of truncated mutant reporter plasmid was compared with that of pGL3-Basic control group. They were 6.32 鹵0.04) -478bp~ 47bp-579 鹵0.32) -811bp-47bprespectively. (3. 59 鹵0. 34) times (1 235 BP ~ 47 BP) and 3 86 鹵0 39) times (1 677 BP ~ 47 BP). The overexpression of HBx could significantly inhibit the activity of SFRP5 promoter. The inhibition rates were -478bp~ 47bpP0.05 / 46 and -811bp-47bpP0. 05 respectively. 28 ~ 1 235 BP ~ 47 BP). 1 677 BP ~ 47 BP) and 40 ~ 2 072 BP ~ 47 BP. Conclusion the activity of SFRP5 promoter can be significantly inhibited by 1: HBx. This may lead to down-regulation of SFRP5 gene expression.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)感染性疾病分子生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No.31171307;o.30972586)
【分類號】：R373
【正文快照】： 全世界大約有4億人感染乙型肝炎病毒(hepa-titis B virus,HBV),中國約占1/3[1]。乙型肝炎病毒屬于嗜肝DNA病毒科,全長3.2 kb,含有4個部分雙鏈的開放讀碼框,分別編碼核心蛋白、表面抗原、X蛋白以及病毒DNA聚合酶,其中乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)的生

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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10 張p，

本文編號：1374878