本文關(guān)鍵詞：RSV感染小膠質(zhì)細(xì)胞活化Toll樣受體3、7介導(dǎo)炎性反應(yīng)的初步研究　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報》2013年08期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的探討呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞(BV2)后,Toll樣受體3(TLR3)和Toll樣受體7(TLR7)的活化及其介導(dǎo)的炎性反應(yīng)。方法①RSV體外感染BV2,利用免疫熒光技術(shù)分別在12、24和36 h檢測細(xì)胞內(nèi)RSV-F蛋白。②分別于感染4、8、12、16、24和36 h收集細(xì)胞,以未感染細(xì)胞作為正常組。用TRIzol提取細(xì)胞總RNA,通過半定量RT-PCR法檢測TLR3、TLR7的mRNA轉(zhuǎn)錄水平的變化。③Western blot法分別檢測感染4、8、12、16、24和36 h后的細(xì)胞內(nèi)核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)蛋白水平的變化。④ELISA法檢測細(xì)胞上清液中腫瘤壞死因子α(TNF-α)含量的變化。結(jié)果①熒光顯微鏡下可以見到FITC標(biāo)記RSV-F蛋白的綠色熒光隨感染時間的延長而增強。②TLR3、TLR7在感染RSV后mRNA水平在觀察的時間內(nèi)表達(dá)均升高并呈時間依賴性關(guān)系。③各感染時間點NF-κB蛋白水平表達(dá)均升高并呈時間依賴性關(guān)系。④感染RSV后,細(xì)胞上清液中TNF-α含量均升高并呈時間依賴性關(guān)系。結(jié)論 RSV感染BV2后可以上調(diào)TLR3、TLR7,從而使下游細(xì)胞炎性因子TNF-α分泌升高,過度的炎性作用可能與神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的發(fā)生相關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of respiratory syncytial virus (RSVV) infection on mouse microglia (BV2). Toll like receptor 3 (TLR3) and Toll like receptor 7 (TLR7) were activated and their inflammatory responses were mediated. The RSV-F protein was detected at 24 h and 36 h after infection. The cells were collected at 24 h and 36 h after infection, respectively. Uninfected cells were used as normal group. Total RNAs were extracted by TRIzol and TLR3 was detected by semi-quantitative RT-PCR method. The changes of mRNA transcription level in TLR7. 3 Western blot assay were used to detect the infection of 4p812m16. Changes of NF-魏 B protein levels in the cell nucleus after 24 and 36 hours. Detection of TNF-偽-TNF- 偽 in the supernatant by Elisa. Results 1 the green fluorescence of FITC labeled RSV-F protein was enhanced with the increase of infection time under fluorescence microscope. The expression of TLR7 increased in a time dependent manner after RSV infection. 3 the expression of NF- 魏 B protein increased in a time dependent manner at all time points. 4After RSV infection. The content of TNF- 偽 in the supernatant was increased in a time dependent manner. Conclusion RSV infection with BV2 can up-regulate TLR3 and TLR7. Thus, the secretion of TNF- 偽 was increased, and the excessive inflammatory effect may be related to the occurrence of nervous system symptoms.
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)微生物學(xué)教研室;安徽中醫(yī)學(xué)院中西醫(yī)結(jié)合臨床學(xué)院;
【基金】：安徽高校省級自然科學(xué)研究重點項目資助(編號:KJ2012A152)
【分類號】：R373
【正文快照】： 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,2013-04-12接收RSV)屬副黏病毒科,肺炎病毒屬,為有包膜非節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA病毒,是導(dǎo)致世界范圍內(nèi)嬰幼兒下呼吸道感染最常見的病原體之一,也是感染老人和免疫低下人群的病原體之一[1]。該病毒侵襲患兒的呼吸道后,主要通過誘導(dǎo)呼

【參考文獻】

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本文編號：1363265