富集兔毛囊干細(xì)胞構(gòu)建組織工程化尿道的研究
本文關(guān)鍵詞:富集兔毛囊干細(xì)胞構(gòu)建組織工程化尿道的研究 出處:《上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2013年03期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的富集兔毛囊干細(xì)胞構(gòu)建組織工程化尿道,觀察其對(duì)尿道缺損的修復(fù)效果。方法應(yīng)用機(jī)械分離與酶消化法分離培養(yǎng)兔毛囊細(xì)胞,體外原代培養(yǎng)擴(kuò)增至3×106個(gè),采用流式細(xì)胞儀富集毛囊干細(xì)胞,分選直徑10μm的integrin-α6+/cd71-細(xì)胞,免疫熒光法檢測(cè)細(xì)胞K19、p63和β1整合素表達(dá)。將毛囊干細(xì)胞接種于膀胱脫細(xì)胞基質(zhì)支架材料上,構(gòu)建組織工程化尿道,掃描電子顯微鏡觀察細(xì)胞在支架上的分布狀態(tài)。利用組織工程化尿道修復(fù)2.5 cm的兔尿道缺損,經(jīng)尿道造影和組織學(xué)檢查觀察缺損修復(fù)效果。結(jié)果免疫熒光法檢測(cè)結(jié)果顯示毛囊干細(xì)胞K19、p63、β1整合素表達(dá)陽(yáng)性。掃描電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞與支架緊密貼附,細(xì)胞伸展適度且有基質(zhì)分泌。組織學(xué)檢查和免疫組織化學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),毛囊干細(xì)胞形成復(fù)層上皮結(jié)構(gòu),AE1/AE3染色陽(yáng)性。組織工程化尿道修復(fù)缺損后3個(gè)月,尿道造影顯示尿道平滑通暢。結(jié)論通過(guò)調(diào)整優(yōu)化分選參數(shù)富集兔毛囊干細(xì)胞,構(gòu)建的組織工程化尿道可用于修復(fù)兔尿道缺損。
[Abstract]:The purpose of the enrichment of rabbit hair follicle stem tissue-engineered urethra cells, observe the urethral defect repair effect. Isolation and culture of rabbit hair follicle cell method using mechanical separation and enzyme digestion method and cultured in vitro amplification to 3 x 106, using flow cytometry and enrichment of hair follicle stem cells, separation of 10 m diameter integrin- alpha 6+/cd71- cells, K19 cells was detected by immunofluorescence, expression of p63 and integrin beta 1. The hair follicle stem cells were seeded on bladder acellular matrix scaffolds and tissue-engineered urethra, scanning electron microscopy of cells on the scaffolds distribution. 2.5 cm repairing rabbit urethral defect using tissue engineered by urethra. Urethra angiography and histological examination to observe the repairing effect. Results the results of immunofluorescence showed that hair follicle stem cells K19, p63, the expression of integrin beta 1 positive cells found. With a scanning electron microscope Frame attached to cell spreading and proper matrix secretion. Histological and immunohistochemical detection of chemical examination found that the formation of epithelial structure of hair follicle stem cells, positive staining of AE1/AE3. 3 months after the repair tissue engineering urethra, urethral urethral smooth angiography showed patency. Conclusion by adjusting the separation parameters of cell enrichment in rabbits hair follicle stem, urethral tissue engineering construction can be used for repairing rabbit urethral defect.
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)附屬珠江醫(yī)院泌尿外科;中山市博愛(ài)醫(yī)院泌尿外科;中山市古鎮(zhèn)醫(yī)院泌尿外科;
【分類號(hào)】:R329
【正文快照】: 組織工程技術(shù)修復(fù)尿道缺損的技術(shù)已較為成熟?谇火つぜ(xì)胞,包皮表皮細(xì)胞都被成功用于構(gòu)建組織工程尿道,成功修復(fù)尿道缺損[1-3]。毛囊干細(xì)胞一次性分離獲取的數(shù)量較少,但其增殖分化能力強(qiáng),至今毛囊干細(xì)胞用于構(gòu)建組織工程尿道并修復(fù)尿道缺損的報(bào)道尚少,本研究擬探索分離培養(yǎng)
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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