本文關(guān)鍵詞：補腎通絡(luò)法組方對骨性關(guān)節(jié)炎模型大鼠軟骨細(xì)胞微絲結(jié)構(gòu)的影響　出處：《安徽中醫(yī)藥大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：1目的通過改良Hulth方法完成SD大鼠膝骨性關(guān)節(jié)炎模型的構(gòu)建,觀察補腎通絡(luò)法組方對該模型大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞骨架微絲結(jié)構(gòu)的影響,進而探究補腎通絡(luò)發(fā)組方治療膝骨性關(guān)節(jié)炎的分子機制。2方法從動物飼養(yǎng)中心購買60只SD大鼠將其隨機分為4組,這4組包括JS(假手術(shù))組、MX(模型)組、XY(西藥,布洛芬)組,ZY(中藥)組,每組各自分得15只。四組中,MX組、XY組、ZY組均采用改良Hulth方法進行模型的制作,(手術(shù)方法:離斷SD大鼠右側(cè)膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)副韌帶、前交叉韌帶,完整分離出內(nèi)側(cè)半月板),JS組的老鼠只切開關(guān)節(jié)囊。術(shù)后常規(guī)飼養(yǎng)六周,建立膝骨性關(guān)節(jié)炎動物模型,以X線是否符合骨關(guān)節(jié)炎的表現(xiàn)來確定造模是否成功,確定造模成功后第一天起開始給藥。各組的用藥劑量:JS組、MX組分別給予生理鹽水(1ml/100g)灌胃;XY組給予布洛芬混懸液(1ml/100g)灌胃;ZY組給予中藥(1ml/100g)灌胃;各組給藥頻率均為一天一次,連續(xù)灌胃6周。于喂藥六周后,處死全部實驗SD大鼠,取大鼠右股骨內(nèi)外髁進行大體觀察。大體觀察后對所有右股骨髁進行常規(guī)脫鈣、蠟塊包埋和切片。對上述切片進行HE染色,觀察右股骨內(nèi)外髁軟骨組織形態(tài)。同時采用改良Mankin’s評分法對軟骨組織進行評定。取上述切片采用免疫熒光標(biāo)記法對軟骨細(xì)胞骨架微絲進行熒光染色,使用CLSM對微絲進行形態(tài)學(xué)觀察和熒光強度的檢測。3結(jié)果(1)大體觀察:JS組右股骨內(nèi)外側(cè)髁軟骨面光滑無退變。MX組右股骨內(nèi)外側(cè)髁軟骨面退變嚴(yán)重。XY組右股骨內(nèi)外側(cè)髁軟骨面退變明顯,但外側(cè)同內(nèi)側(cè)相比較輕。ZY組右股骨內(nèi)側(cè)髁軟骨面輕度退變,外側(cè)髁光滑無退變。(2)軟骨組織學(xué)觀察:JS組股骨內(nèi)外側(cè)髁軟骨的四層結(jié)構(gòu)完整,軟骨細(xì)胞數(shù)量正常。MX組股骨內(nèi)外側(cè)髁部分區(qū)域軟骨的四層結(jié)構(gòu)均有損壞,軟骨細(xì)胞的數(shù)量有所減少,內(nèi)側(cè)損傷較輕。XY組股骨內(nèi)側(cè)髁部分區(qū)域損傷到軟骨肥大細(xì)胞層,細(xì)胞數(shù)量減少,外側(cè)髁軟骨損傷到中間層,細(xì)胞數(shù)量增多。ZY組股骨內(nèi)側(cè)髁軟骨的表淺層有損傷,軟骨細(xì)胞數(shù)量正常,外側(cè)髁軟骨同JS組無異。(3)微絲結(jié)構(gòu)的觀察:JS組股骨內(nèi)外側(cè)髁軟骨的微絲為與細(xì)胞長軸平行的線狀纖維。MX組股骨內(nèi)外側(cè)髁軟骨微絲發(fā)生明顯的固縮。XY組股骨內(nèi)側(cè)髁軟骨微絲發(fā)生明顯的固縮,外側(cè)軟骨微絲適度的增粗和固縮,但程度較內(nèi)側(cè)輕。ZY組股骨內(nèi)外側(cè)髁軟骨的微絲與JS組相比保持著較好的線狀形態(tài)。(4)Mankin’s評分:組間比較:對股骨內(nèi)外側(cè)髁軟骨四組間的Mankin’s評分進行比較,四組不完全相等(p0.01);分別對四組間內(nèi)側(cè)和外側(cè)髁軟骨的Mankin’s評分進行兩兩比較,發(fā)現(xiàn)四組中內(nèi)側(cè)髁任意兩組間的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義,外側(cè)髁任意兩組間的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。四組間的內(nèi)外側(cè)髁的Mankin’s評分表現(xiàn)的趨勢一樣,MX組最高,其次是XY組,ZY組低于XY組但高于JS組。組內(nèi)比較:除JS和MX組內(nèi)外側(cè)髁的Mankin’s評分的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),ZY和XY組內(nèi)外側(cè)髁的Mankin’s評分差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01)。(5)微絲的定量分析:四組間股骨內(nèi)外側(cè)髁軟骨細(xì)胞骨架微絲熒光定量分析,各組間內(nèi)外側(cè)髁的微絲含量差異均沒有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。4結(jié)論(1)骨性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞骨架微絲結(jié)構(gòu)有形態(tài)學(xué)形變;(2)補腎通絡(luò)組方可以抑制膝骨性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞微絲形變,對保護軟骨組織完整有一定作用;(3)正常軟骨與骨性關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞骨架微絲的含量無變化。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R285.5;R-332

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本文編號：1349130