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快速衰老小鼠張口呼吸模型制備及其線粒體功能損傷研究

發(fā)布時間:2017-12-28 17:38

  本文關(guān)鍵詞:快速衰老小鼠張口呼吸模型制備及其線粒體功能損傷研究 出處:《江蘇大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


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【摘要】:目的1.探索安全高效制備張口呼吸小鼠模型方法。2.制備基于快速衰老小鼠(SAMP)的張口呼吸模型,并探究張口呼吸對上氣道組織線粒體功能損傷的影響。方法1.將20只C57BL/6分為縫合組(n=10)與填塞組(n=10),分別行外鼻孔縫合與鼻腔填塞,比較分析外鼻孔縫合與鼻腔填塞兩種造模方法下小鼠死亡率與鼻腔阻塞物脫落率,選擇低死亡率低脫落率的鼻腔阻塞方法用于進(jìn)一步造模研究。2.快速衰老小鼠張口呼吸模型線粒體功能損傷研究:將4月齡SAMP6小鼠12只與SAMR1小鼠12只分別行鼻腔阻塞,制備張口呼吸模型(SAMP6_OR和SAMR1_OR)。造模后,各取4只備用于1周后取材。剩余小鼠分別飼養(yǎng)至6月齡(n=4)、8月齡(n=4),取相同數(shù)量同月齡SAMP6小鼠與SAMR1小鼠與之匹配備取材。每只小鼠取皮膚、上氣道肌肉、腹直肌、上氣道黏膜、頦舌肌、臀大肌、白細(xì)胞制備細(xì)胞樣本,加載JC-1并進(jìn)行線粒體膜電位檢測。比較分析4、6、8月齡SAMP6與SAMR1、SAMP6_OR與SAMP6、SAMR1_OR與SAMR1小鼠各組織線粒體膜電位。分析4、6、8月齡SAMP6與SAMR1小鼠各組織線粒體膜電位變化趨勢。結(jié)果1.縫合造模法與填塞造模法造模死亡率與鼻腔阻塞物脫落率比較1)鼻腔縫合法造模死亡率(70%)顯著高于鼻腔填塞法(0%)(P0.05)。2)縫合組線結(jié)脫落率(50%)與鼻腔填塞組填塞物脫落率(20%)無顯著差異(P0.05)。2.快速衰老小鼠張口呼吸模型線粒體功能損傷研究1)SAMP6與SAMR1小鼠相比,全身大部分組織線粒體膜電位顯著降低(P0.05)。2)SAMP6小鼠4、6、8月齡之間皮膚(P0.05)、上氣道肌肉(P0.05)、腹直肌(P0.05)、上氣道黏膜(P0.05)、頦舌肌(P0.05)、臀大肌(P0.05)、白細(xì)胞(P0.05)線粒體膜電位均存在顯著差異。3)SAMR1小鼠4、6、8月齡之間上氣道黏膜(P0.05)、頦舌肌(P0.05)、白細(xì)胞(P0.05)線粒體膜電位之間存在顯著差異。但皮膚(P0.05)、上氣道肌肉(P0.05)、腹直肌(P0.05)、臀大肌(P0.05)線粒體膜電位無顯著差異。4)SAMP6_OR小鼠皮膚、腹直肌、上氣道肌肉與黏膜組織、白細(xì)胞線粒體膜電位顯著低于SAMP6小鼠(P0.05)。5)SAMPR1_OR小鼠上氣道肌肉線粒體膜電位、白細(xì)胞膜電位顯著低于SAMPR1小鼠(P0.05)。結(jié)論1.使用鼻腔填塞法進(jìn)行張口呼吸小鼠模型造模創(chuàng)傷小,死亡率低,不易脫落,可用于進(jìn)一步造模研究。2.快速衰老與自然衰老過程中線粒體功能均隨年齡增長而下降,各組織衰老進(jìn)程存在差異。快速衰老小鼠張口呼吸模型上氣道肌肉與黏膜損傷更為嚴(yán)重,在此基礎(chǔ)上還出現(xiàn)了皮膚、腹直肌、白細(xì)胞線粒體功能損傷,這種損傷存在全身性趨勢。但自然衰老小鼠張口呼吸模型中僅上氣道肌肉、白細(xì)胞損傷較為明顯,是否存在全身性趨勢有待進(jìn)一步研究。
[Abstract]:Objective 1. to explore a safe and efficient method of making mouth breathing mice model. 2. to prepare the mouth breathing model based on rapid aging mice (SAMP) and to explore the effect of mouth breathing on mitochondrial dysfunction in upper airway tissue. Methods 1. 20 C57BL/6 divided into suture group (n=10) and packing group (n=10), respectively. The external naris suture and nasal packing, a comparative analysis of the external naris suture and nasal packing two models under the mortality of mice with nasal obstruction abscission rate, low mortality low shedding rate of nasal obstruction for further modeling research. 2., fast aging mice mouth breathing model mitochondrial function damage research: 4 month old SAMP6 mice and 12 SAMR1 mice 12 nasal blockage, to prepare mouth breathing model (SAMP6_OR and SAMR1_OR). After the model, 4 were taken for 1 weeks. The remaining mice were fed to 6 month old (n=4) and 8 month old (n=4) respectively, and the same number of SAMP6 mice of the same month age and SAMR1 mice were obtained. Each mouse was prepared from skin, upper airway muscle, rectus abdominis, upper airway mucosa, genu lingual muscle, gluteus maximus and white blood cell. Samples were loaded with JC-1 and mitochondrial membrane potential was detected. The mitochondrial membrane potential of 4, 6, 8 month old SAMP6 and SAMR1, SAMP6_OR and SAMP6, SAMR1_OR and SAMR1 mice was compared and analyzed. The changes of mitochondrial membrane potential in the tissues of 4, 6, 8 month old SAMP6 and SAMR1 mice were analyzed. Results 1. there was a 1 Comparison between the rate of die building and the rate of obstruction of the nasal cavity by suturing and modeling. 1) the mortality rate of nasal cavity suture was higher than that of nasal packing (0%) (P0.05). 2) there was no significant difference between the loss rate of line knot (50%) in the suture group and the loss rate of the stuffing in the nasal packing group (20%) (P0.05). 2., fast aging mice mouth breathing model mitochondrial dysfunction. 1) SAMP6, compared with SAMR1 mice, the mitochondrial membrane potential of most tissues decreased significantly (P0.05). 2) there were significant differences in mitochondrial membrane potential between skin, P0.05, upper airway muscle (P0.05), rectus abdominis muscle (P0.05), upper airway mucosa (P0.05), genu gluteal muscle (P0.05), gluteus maximus muscle (P0.05) and white blood cell (P0.05) in SAMP6 mice between 4, 6 and 8 month old. 3) there were significant differences in the mitochondrial membrane potential of the upper airway mucosa (P0.05), genial tongue muscle (P0.05) and leukocyte (P0.05) between 4, 6 and 8 month old of SAMR1 mice. But there was no significant difference in the mitochondrial membrane potential of the skin (P0.05), the upper airway muscle (P0.05), the rectus abdominis (P0.05) and the gluteus maximus (P0.05). 4) the potential of SAMP6_OR mice skin, rectus abdominis muscle, upper airway muscle and mucous membrane tissue and leukocyte mitochondrial membrane potential were significantly lower than that of SAMP6 mice (P0.05). 5) the mitochondrial membrane potential and the white cell membrane potential of the upper airway muscle of SAMPR1_OR mice were significantly lower than that of SAMPR1 mice (P0.05). Conclusion 1. using the nasal cavity filling method to make the mouth breathing mice model is less traumatic, the death rate is low, and it is not easy to fall off. It can be used for further study of the model. 2. in the process of rapid senescence and natural aging, the function of mitochondria decreased with age, and there was a difference in the aging process of each tissue. In the fast aging mice, the upper airway muscle and mucosa injury is more serious, and there are skin damage, rectus abdominis and white cell mitochondrial dysfunction. However, only the upper airway muscle and white blood cell damage in the mouth breathing model of natural aging mice are more obvious, and whether there is a systemic trend is to be further studied.
【學(xué)位授予單位】:江蘇大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R766;R-332

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本文編號:1346810

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