本文關(guān)鍵詞：小鼠肥大細(xì)胞蛋白酶4的原核表達(dá)和多克隆抗體制備　出處：《合肥工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2013年10期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 肥大細(xì)胞蛋白酶(mMCP-) 原核表達(dá) 多克隆抗體

【摘要】：文章構(gòu)建小鼠肥大細(xì)胞蛋白酶4(mMCP-4)原核表達(dá)體系,獲得原核表達(dá)蛋白,并制備兔抗mMCP-4多克隆抗體,提取小鼠脾細(xì)胞總RNA,運(yùn)用RT-PCR技術(shù)獲得目的基因mMCP-4,構(gòu)建重組原核表達(dá)載體pET28a-mMCP-4,將其轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21中誘導(dǎo)表達(dá)。mMCP-4融合蛋白經(jīng)Ni親和層析法純化后,作為抗原免疫兔子獲得mMCP-4多克隆抗體。采用ELISA法測(cè)抗體效價(jià),western blot檢測(cè)抗體特異性。結(jié)果表明,構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒pET28a-mMCP-4,經(jīng)大規(guī)模原核表達(dá)獲得大量mMCP-4融合蛋白,制備的兔抗血清效價(jià)達(dá)1∶128 000,并表現(xiàn)出較好特異性。研究結(jié)果為進(jìn)一步研究mMCP-4生物學(xué)功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 合肥工業(yè)大學(xué)生物與食品工程學(xué)院;
【基金】：安徽省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(11040606M92)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 肥大細(xì)胞在人體內(nèi)參與傷口愈合、血管發(fā)生、天然免疫和獲得性免疫,目前研究表明,肥大細(xì)胞在多發(fā)性硬化、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈粥樣硬化、主動(dòng)脈瘤、癌癥以及飲食導(dǎo)致的肥胖和糖尿病等疾病中起重要作用[1]。成熟的肥大細(xì)胞通過(guò)脫顆粒分泌大量生物活性物質(zhì),包括生物胺類(如組胺和

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1331125