乙肝免疫球蛋白抗體的多樣性
本文關(guān)鍵詞:乙肝免疫球蛋白抗體的多樣性 出處:《解剖學(xué)報(bào)》2013年04期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的基于重鏈可變區(qū)的編碼基因序列對乙肝免疫球蛋白(HBIG)中的IgG抗體進(jìn)行分類。方法借用文獻(xiàn)提供的引物,以HBsAb強(qiáng)陽性健康個(gè)體外周血中的總RNA為模板進(jìn)行RT-PCR和Nested-PCR擴(kuò)增,通過將產(chǎn)物克隆到T載體、隨機(jī)挑選測序,分析并統(tǒng)計(jì)出插入子的VH-D-JH-Cγ組合方式。結(jié)果共獲得56個(gè)有效克隆,全部為人VH3-D-JH-Cγ序列,可分成49種序列,其中5種序列有2或3個(gè)序列完全相同的克隆。4個(gè)Cγ功能基因也全部出現(xiàn),其中IGHG2頻率最高(28次);23個(gè)VH3功能基因有11個(gè)出現(xiàn),其中頻率最高的是IGHV3-23(29次);23個(gè)D功能基因有16個(gè)出現(xiàn),其中頻率最高的是IGHD1-26(8次);6個(gè)JH功能基因則全部出現(xiàn),其中頻率最高的是IGHJ4(33次)。VH3-D-JH組合有33種,頻率最高的是IGHV3-23/IGHD1-26/IGHJ4(8次),其中5種與IGHG2拼接,但這5種VH3-D-JH-Cγ2序列仍有明顯的差異。結(jié)論成功地從HBsAb強(qiáng)陽性健康個(gè)體外周血中克隆到由VH3亞家族參與重排的IgG重鏈可變區(qū)序列;初步證實(shí)可變區(qū)序列不僅在VH3-D-JH-Cγ組合方式上具有極大的多樣性,而且在序列上也具有明顯的差異性;基于可變區(qū)測序?qū)gG抗體或B細(xì)胞進(jìn)行分類是可行的,但需大大提高挑取克隆的數(shù)量或改用新一代大規(guī)模測序技術(shù)。
【作者單位】: 舟山醫(yī)院細(xì)胞分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室;舟山醫(yī)院-中國科學(xué)院北京基因組研究所免疫基因組學(xué)聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室;舟山醫(yī)院檢驗(yàn)中心;舟山醫(yī)院傳染科;
【基金】:浙江省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2010KYB141)
【分類號】:R392
【正文快照】: 在緊急預(yù)防乙肝病毒(HBV)感染時(shí),輸注乙肝免疫球蛋白(hepatitis B immunoglobulin,HBIG)是最常用及最有效的措施[1]。然而,HBIG是用乙肝疫苗接種獻(xiàn)血員后分離的混合血漿,其來源、品質(zhì)和安全均難以得到有效的保障,臨床上迫切需要一種較為理想的HBIG替代品[2]。目前認(rèn)為,HBIG的
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,本文編號:1326365
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