本文關(guān)鍵詞：微流控電融合芯片的研制及其在體細(xì)胞重編程中的應(yīng)用　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》2013年01期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的開發(fā)高通量的細(xì)胞電融合平臺,并通過此平臺將小鼠胚胎干細(xì)胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)與體細(xì)胞融合,探討融合細(xì)胞的多能性。方法本實驗室自主研發(fā)微流控芯片,將轉(zhuǎn)染了綠色熒光的mESCs與轉(zhuǎn)染了紅色熒光的NIH3T3細(xì)胞進(jìn)行電融合,并計算其排隊率與融合率。通過流式細(xì)胞儀篩選出表達(dá)兩種熒光的融合細(xì)胞,觀察融合細(xì)胞的表型。RT-PCR檢測NIH3T3、mESC以及融合細(xì)胞的多能性基因(Nanog、OCT4、SOX2和LIN28)mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果自主研發(fā)了微流控芯片,構(gòu)建了高通量的細(xì)胞電融合平臺,通過此平臺將mESCs與NIH3T3進(jìn)行電融合,其排隊率為(44.35±10.99)%,融合率為(59.88±20.03)%,融合細(xì)胞可形成類似于ESC樣的克隆。RT-PCR法結(jié)果顯示mESC和融合細(xì)胞均表達(dá)多能性基因Nanog、OCT4、SOX2和LIN28 mRNA,而NIH3T3不表達(dá)。結(jié)論通過自主研發(fā)的微流控芯片,可實現(xiàn)mESCs與NIH3T3的高效融合,使體細(xì)胞重編程為多能性干細(xì)胞。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院全軍眼科中心;視覺損傷與再生修復(fù)重慶市重點實驗室;重慶大學(xué)生物工程學(xué)院;
【基金】：重慶市留學(xué)回國人員啟動基金(CSTC2011jjzt0137) 國家自然科學(xué)基金(31071299)~~
【分類號】：R346
【正文快照】： 已分化的體細(xì)胞可以通過重編程來改變其命運(yùn),在一定條件下可以轉(zhuǎn)化為其他類型的細(xì)胞,甚至回到多能狀態(tài)。而由患者自身體細(xì)胞重編程而來的誘導(dǎo)性多能性干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,iPSC),可作為細(xì)胞移植的種子細(xì)胞使用,避免了使用胚胎干細(xì)胞所面臨的倫理學(xué)障礙,并

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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2 鄭小林;鄢佳文;胡寧;楊軍;楊靜;;基于直列式交錯微電極陣列的細(xì)胞電融合[J];傳感器與微系統(tǒng);2012年02期

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4 張小玲;楊軍;胡寧;侯文生;鄭小林;謝琳;楊忠;陳潔;;基于薄膜電極的細(xì)胞電融合芯片[J];高等學(xué)�；瘜W(xué)學(xué)報;2012年08期

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2 屈婭;基于細(xì)胞電融合技術(shù)的體細(xì)胞重編程研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前6條

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3 張瑞強(qiáng);陣列式高通量細(xì)胞培養(yǎng)芯片設(shè)計與制作[D];重慶大學(xué);2009年

4 夏斌;基于硅玻基底材料的細(xì)胞電融合芯片的仿真及實驗研究[D];重慶大學(xué);2010年

5 賀文超;微電極芯片系統(tǒng)中高產(chǎn)表面活性劑酵母細(xì)胞融合及篩選研究[D];重慶大學(xué);2010年

6 宋振;基于微流控芯片構(gòu)建三維基質(zhì)支架中的腫瘤細(xì)胞侵襲模型[D];重慶大學(xué);2012年

【二級參考文獻(xiàn)】

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1 曹毅;楊軍;胡寧;楊靜;夏斌;鄭小林;;高通量細(xì)胞電融合芯片研究進(jìn)展[J];傳感器與微系統(tǒng);2009年03期

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3 胡寧;楊軍;侯文生;鄭小林;曹毅;楊靜;許蓉;張瑞強(qiáng);;基于SOI基底的高通量細(xì)胞電融合芯片[J];高等學(xué)�；瘜W(xué)學(xué)報;2009年01期

4 雷安民;馬曉玲;高志敏;胡勇策;隋進(jìn)強(qiáng);黃偉偉;昝林森;竇忠英;;牛體細(xì)胞核移植顯微操作環(huán)節(jié)的優(yōu)化[J];生物工程學(xué)報;2009年09期

5 張瑞強(qiáng);楊軍;金慶輝;趙建龍;鄭小林;彭承琳;;細(xì)胞電融合技術(shù)及最新進(jìn)展[J];中國生物工程雜志;2008年09期

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【相似文獻(xiàn)】

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1 沈干,吳春芳,叢笑倩,劉曉音,劉偉,曹誼林;胚胎干細(xì)胞在轉(zhuǎn)化生長因子-β1誘導(dǎo)下表達(dá)vWF、CD34的研究[J];中華實驗外科雜志;2003年01期

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5 傅玉如,陳s，

本文編號：1320075