發(fā)布時(shí)間：2017-12-22 16:02

  本文關(guān)鍵詞：微流控電融合芯片的研制及其在體細(xì)胞重編程中的應(yīng)用　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2013年01期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 電融合 體細(xì)胞重編程 微流控芯片 胚胎干細(xì)胞

【摘要】：目的開發(fā)高通量的細(xì)胞電融合平臺(tái),并通過(guò)此平臺(tái)將小鼠胚胎干細(xì)胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)與體細(xì)胞融合,探討融合細(xì)胞的多能性。方法本實(shí)驗(yàn)室自主研發(fā)微流控芯片,將轉(zhuǎn)染了綠色熒光的mESCs與轉(zhuǎn)染了紅色熒光的NIH3T3細(xì)胞進(jìn)行電融合,并計(jì)算其排隊(duì)率與融合率。通過(guò)流式細(xì)胞儀篩選出表達(dá)兩種熒光的融合細(xì)胞,觀察融合細(xì)胞的表型。RT-PCR檢測(cè)NIH3T3、mESC以及融合細(xì)胞的多能性基因(Nanog、OCT4、SOX2和LIN28)mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果自主研發(fā)了微流控芯片,構(gòu)建了高通量的細(xì)胞電融合平臺(tái),通過(guò)此平臺(tái)將mESCs與NIH3T3進(jìn)行電融合,其排隊(duì)率為(44.35±10.99)%,融合率為(59.88±20.03)%,融合細(xì)胞可形成類似于ESC樣的克隆。RT-PCR法結(jié)果顯示mESC和融合細(xì)胞均表達(dá)多能性基因Nanog、OCT4、SOX2和LIN28 mRNA,而NIH3T3不表達(dá)。結(jié)論通過(guò)自主研發(fā)的微流控芯片,可實(shí)現(xiàn)mESCs與NIH3T3的高效融合,使體細(xì)胞重編程為多能性干細(xì)胞。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院全軍眼科中心;視覺損傷與再生修復(fù)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;重慶大學(xué)生物工程學(xué)院;
【基金】：重慶市留學(xué)回國(guó)人員啟動(dòng)基金(CSTC2011jjzt0137) 國(guó)家自然科學(xué)基金(31071299)~~
【分類號(hào)】：R346
【正文快照】： 已分化的體細(xì)胞可以通過(guò)重編程來(lái)改變其命運(yùn),在一定條件下可以轉(zhuǎn)化為其他類型的細(xì)胞,甚至回到多能狀態(tài)。而由患者自身體細(xì)胞重編程而來(lái)的誘導(dǎo)性多能性干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,iPSC),可作為細(xì)胞移植的種子細(xì)胞使用,避免了使用胚胎干細(xì)胞所面臨的倫理學(xué)障礙,并

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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5 傅玉如,陳s，

本文編號(hào)：1320075