本文關(guān)鍵詞：免疫瘦素受體胞外近跨膜區(qū)重組融合蛋白對(duì)SD大鼠脂肪沉積的影響

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【摘要】：目的原核表達(dá)瘦素受體(OBR)近跨膜區(qū)重組融合蛋白并進(jìn)行SD大鼠免疫實(shí)驗(yàn),觀察其對(duì)SD大鼠脂肪沉積的影響。方法設(shè)計(jì)1對(duì)帶有BamHⅠ和HindⅢ酶切位點(diǎn)特異性引物,擴(kuò)增OBR胞外近跨膜區(qū)基因片段(1705~2364 bp),經(jīng)酶切后連接到表達(dá)載體pRSETA的BamHⅠ和HindⅢ兩酶切位點(diǎn)之間,構(gòu)建OBR胞外近跨膜區(qū)重組表達(dá)質(zhì)粒并在大腸桿菌E.coli BL21(DE3)中表達(dá),SDS-PAGE電泳分析和western blotting鑒定表達(dá)產(chǎn)物。隨后制備OBR胞外近跨膜區(qū)重組融合蛋白并免疫SD大鼠,觀察其對(duì)SD大鼠體質(zhì)量、采食量、體長、Lee's指數(shù)、腹脂率、肝臟脂肪沉積、皮下脂肪沉積的影響。結(jié)果 SDS-PAGE電泳分析和Western blotting鑒定結(jié)果顯示,在IPTG誘導(dǎo)下OBR胞外近跨膜區(qū)重組表達(dá)菌表達(dá)了相對(duì)分子質(zhì)量27 600左右的融合蛋白。對(duì)SD大鼠免疫OBR胞外近跨膜區(qū)重組融合蛋白后,體質(zhì)量、體長、Lee's指數(shù)、腹脂率、肝臟脂肪沉積與對(duì)照組無明顯差異,而采食量顯著增加、皮下脂肪細(xì)胞體積減小。結(jié)論成功表達(dá)西藏小型豬瘦素受體胞外近跨膜區(qū)重組融合蛋白,免疫SD大鼠可促進(jìn)采食和抑制皮下脂肪沉積。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心暨比較醫(yī)學(xué)研究所;東莞松山湖明珠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技有限公司;華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國家973計(jì)劃(2011CBA01006) 863項(xiàng)目(2011AA100304-1) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2009B060300009,2010A011200003,2010A030400001,2011B060300028,2010B060500001) 廣州市科技計(jì)劃(2010U1-E021) 廣州市重大科技專項(xiàng)(2010U1-E00811-3)~~
【分類號(hào)】：R-332
【正文快照】： 隨著人們生活水平的提高和飲食結(jié)構(gòu)的變化,目前肥胖在全世界呈流行趨勢(shì)[1]。肥胖既是一種獨(dú)立的疾病,又可能誘發(fā)糖尿病、脂肪肝、高血壓、中風(fēng)和多種癌癥等疾病[1-3]。有研究發(fā)現(xiàn)瘦素及瘦素受體(OBR)功能異常、瘦素抵抗是導(dǎo)致部分人肥胖的原因。瘦素是由脂肪組織合成的一種重

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本文編號(hào)：1297512