本文關(guān)鍵詞：人外周血耐受性樹突狀細胞的誘導(dǎo)培養(yǎng)及其DC-STAMP的表達研究

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【摘要】：［目的］誘導(dǎo)培養(yǎng)人外周血耐受性樹突狀細胞（TolDCs）并動態(tài)觀察TolDCs誘導(dǎo)過程樹突狀細胞-特異性跨膜蛋白(dendritic cells-specific transmembraneprotein, DC-STAMP) mRNA的表達水平。 ［方法］（1）免疫磁珠分選法獲得人外周血CD14+單核細胞，采用細胞因子GM-CSF、IL-4、地塞米松和LPS聯(lián)合培養(yǎng)誘導(dǎo)TolDCs；（2）觀察培養(yǎng)細胞的形態(tài)變化，流式細胞技術(shù)檢測CD83、CD86和CD14的表達，并將培養(yǎng)的細胞與T淋巴細胞共培養(yǎng)觀察T淋巴細胞增殖反應(yīng)；（3）采用實時定量PCR對TolDCs誘導(dǎo)培養(yǎng)過程中DC-STAMP mRNA表達水平進行動態(tài)觀察。 ［結(jié)果］（1）CD14+單核細胞經(jīng)粒細胞巨噬細胞刺激因子（Granulocyte-macrophagecolony-stimulating factor，GM-CSF）、白介素-4（Interleukin-4，，IL-4）、脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）誘導(dǎo)培養(yǎng)后胞體變大，出現(xiàn)樹枝狀突起，為典型的成熟DCs形態(tài)，加地塞米松磷酸鈉（Dexamethasone sodium phosphate，Dex）誘導(dǎo)培養(yǎng)后胞體亦變大，但未見明顯樹枝狀突起，缺乏典型的成熟DCs形態(tài)；（2）CD14+單核細胞經(jīng)GM-CSF、IL-4培養(yǎng)后使CD83和CD86表達上調(diào)，CD14表達下調(diào)，加Dex聯(lián)合誘導(dǎo)培養(yǎng)后DCs表面CD83、CD86表達下調(diào)、CD14表達上調(diào)，與T淋巴細胞共培養(yǎng)后增殖反應(yīng)明顯減弱，顯示TolDCs的免疫表型和功能特性；（3） CD14+單核細胞經(jīng)GM-CSF、IL-4培養(yǎng)后DC-STAMP mRNA的表達水平隨培養(yǎng)時間延長降低，加入Dex聯(lián)合誘導(dǎo)后表達水平明顯增加。 ［結(jié)論］人外周血CD14+單核細胞采用GM-CSF、IL-4和Dex聯(lián)合培養(yǎng)可誘導(dǎo)TolDCs生成， DC-STAMP可能與DCs的致耐受功能有關(guān)。
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R392.12

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本文編號：1297260