本文關(guān)鍵詞：血清和無血清誘導(dǎo)方法分化小鼠胚胎干細(xì)胞為定形內(nèi)胚層的比較

  更多相關(guān)文章： 胚胎干細(xì)胞 定形內(nèi)胚層 細(xì)胞分化 血清

【摘要】：目的比較兩種方法(血清誘導(dǎo)方法和無血清誘導(dǎo)方法)誘導(dǎo)小鼠胚胎干細(xì)胞分化為定形內(nèi)胚層細(xì)胞的效率。方法利用血清誘導(dǎo)法和無血清誘導(dǎo)法分別誘導(dǎo)分化小鼠胚胎干細(xì)胞,根據(jù)定形內(nèi)胚層表面標(biāo)記蛋白(Cxcr4、c-Kit和E-cadherin)的表達(dá),通過流式細(xì)胞術(shù)分析定形內(nèi)胚層誘導(dǎo)的時(shí)間及效率,并利用RT-PCR檢測兩種方法誘導(dǎo)的定形內(nèi)胚層基因表達(dá)譜;同時(shí)利用熒光定量PCR檢測無血清誘導(dǎo)過程中內(nèi)胚層基因的表達(dá)情況;利用流式細(xì)胞術(shù)分選Cxcr4和c-Kit雙陽性細(xì)胞進(jìn)行定形內(nèi)胚層基因表達(dá)的鑒定。結(jié)果血清誘導(dǎo)法和無血清誘導(dǎo)法都能夠?qū)⑴咛ジ杉?xì)胞誘導(dǎo)分化為定形內(nèi)胚層,其中無血清組的誘導(dǎo)效率高于血清組,高達(dá)74.19%,并且在誘導(dǎo)的第4天就能到達(dá)峰值。結(jié)論建立了高效快捷的誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化為定形內(nèi)胚層細(xì)胞的方法,為進(jìn)一步向肝、胰等組織細(xì)胞誘導(dǎo)打下了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 北京市神經(jīng)外科研究所;北京醫(yī)院普通外科;中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所;第二軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部細(xì)胞生物學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30671044/C07)~~
【分類號】：R321
【正文快照】： 胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cells,ES)來源于哺乳動(dòng)物囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán),在合適的誘導(dǎo)條件下,可以定向分化為外胚層、中胚層、定形內(nèi)胚層(definitiveendoderm,DE)來源的功能性細(xì)胞。由于多潛能分化特性和體外自我更新的增殖能力[1],ES成為組織工程及細(xì)胞治療的“種子細(xì)胞”首選來

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