本文關鍵詞：血清和無血清誘導方法分化小鼠胚胎干細胞為定形內(nèi)胚層的比較

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【摘要】：目的比較兩種方法(血清誘導方法和無血清誘導方法)誘導小鼠胚胎干細胞分化為定形內(nèi)胚層細胞的效率。方法利用血清誘導法和無血清誘導法分別誘導分化小鼠胚胎干細胞,根據(jù)定形內(nèi)胚層表面標記蛋白(Cxcr4、c-Kit和E-cadherin)的表達,通過流式細胞術分析定形內(nèi)胚層誘導的時間及效率,并利用RT-PCR檢測兩種方法誘導的定形內(nèi)胚層基因表達譜;同時利用熒光定量PCR檢測無血清誘導過程中內(nèi)胚層基因的表達情況;利用流式細胞術分選Cxcr4和c-Kit雙陽性細胞進行定形內(nèi)胚層基因表達的鑒定。結(jié)果血清誘導法和無血清誘導法都能夠?qū)⑴咛ジ杉毎T導分化為定形內(nèi)胚層,其中無血清組的誘導效率高于血清組,高達74.19%,并且在誘導的第4天就能到達峰值。結(jié)論建立了高效快捷的誘導胚胎干細胞分化為定形內(nèi)胚層細胞的方法,為進一步向肝、胰等組織細胞誘導打下了基礎。
【作者單位】： 北京市神經(jīng)外科研究所;北京醫(yī)院普通外科;中國科學院上海生命科學研究院生物化學與細胞生物學研究所;第二軍醫(yī)大學基礎部細胞生物學教研室;
【基金】：國家自然科學基金(30671044/C07)~~
【分類號】：R321
【正文快照】： 胚胎干細胞(embryonic stem cells,ES)來源于哺乳動物囊胚內(nèi)細胞團,在合適的誘導條件下,可以定向分化為外胚層、中胚層、定形內(nèi)胚層(definitiveendoderm,DE)來源的功能性細胞。由于多潛能分化特性和體外自我更新的增殖能力[1],ES成為組織工程及細胞治療的“種子細胞”首選來

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