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LIM礦化蛋白-1對間充質干細胞成骨分化影響的實驗研究

發(fā)布時間:2017-12-11 05:28

  本文關鍵詞:LIM礦化蛋白-1對間充質干細胞成骨分化影響的實驗研究


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【摘要】:目的:構建LIM礦化蛋白-1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)的真核表達質粒,并在兔骨髓間充質干細胞(bonemarrow mesenchymal stem cells,BMSCs)內表達,研究LMP-1對體外培養(yǎng)BMSCs成骨分化的影響。方法:RT-PCR克隆hLMP-1和骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2),并構建pIRES2-EGFP-LMP-1及pIRES2-EGFP-BMP-2重組質粒。分離培養(yǎng)BMSCs,脂質體介導下將pIRES2-EGFP-LMP-1、pIRES2-EGFP-BMP-2和pIRES2-EGFP質粒轉染BMSCs。7 d后收集細胞,RT-PCR比較hLMP-1、hBMP-2及Ⅰ型膠原的表達,檢測堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,免疫組化染色比較骨鈣素表達。結果:pIRES2-EGFP-LMP-1和pIRES2-EGFP-BMP-2重組質粒構建成功。重組質粒成功轉染BMSCs,RT-PCR證實表達目的基因,hLMP-1和hBMP-2轉染組可以明顯促進細胞分泌ALP的活性,誘導Ⅰ型膠原和骨鈣素的表達。結論:LMP-1可以促進BMSCs向成骨細胞分化。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院骨科;重慶市中醫(yī)骨科醫(yī)院骨科;
【分類號】:R329
【正文快照】: LIM礦化蛋白-1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)是Boden等[1]在1998年通過差顯PCR的方法,從小鼠成骨細胞中克隆并命名的。實驗證實其在成骨細胞分化早期就有表達,并且可能參與了骨形成2種方式的最后共同通路。體內外實驗均證實其可以促進成骨祖細胞和外周血來源的間質干

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