本文關(guān)鍵詞：日本血吸蟲T2核酸酶的原核表達及活性分析

  更多相關(guān)文章： 日本血吸蟲 T核酸酶 蟲卵抗原 AY 克隆 表達 活性分析

【摘要】：目的構(gòu)建日本血吸蟲T2核酸酶表達載體,并進行體外表達和酶活性分析。方法從日本血吸蟲基因組數(shù)據(jù)庫中找到與曼氏血吸蟲蟲卵抗原Omega-1同源性最高的蛋白AY814845,設(shè)計引物并通過PCR技術(shù)擴增得到該基因,將其成熟編碼區(qū)連入pET32a表達載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌并用IPTG誘導(dǎo)其表達,最后對表達產(chǎn)物的核酸酶活性進行分析。結(jié)果成功的構(gòu)建了日本血吸蟲T2核酸酶的表達載體,其編碼區(qū)能夠在大腸桿菌中表達,且表達產(chǎn)物具有一定的核酸酶活性。結(jié)論從體外擴增了日本血吸蟲T2核酸酶AY814845,明確其表達產(chǎn)物具有核酸酶活性,為今后深入研究該蛋白的功能打下了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南通大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)系;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(81171589,31100112) 江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項目(PAPD)聯(lián)合資助~~
【分類號】：R383.2
【正文快照】： T2核酸酶是一類底物非特異性的酸性核酸酶,廣泛分布于微生物、植物和哺乳動物中,往往作為分泌蛋白分泌到細胞外[1]。它們功能豐富,參與多種細胞生命活動[2-5]。在我國,日本血吸蟲對人體最重要的危害是蟲卵引起的肉芽腫及繼發(fā)的肝纖維化[6]。而肝纖維化 的發(fā)生過程,與Th1/Th2

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