本文關(guān)鍵詞：β-hCG蛋白在大腸桿菌系統(tǒng)的表達(dá)、純化及活性鑒定

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【摘要】：目的獲得β-人絨毛膜促性腺激素(β-hCG)融合蛋白β-hCG/GST并驗(yàn)證其抗原活性。方法利用PCR法擴(kuò)增β-hCG全長(zhǎng)基因,將其克隆至原核表達(dá)載體pET-42a中,構(gòu)建重組質(zhì)粒pET-42a-β-hCG,將該重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE3)中IPTG誘導(dǎo)表達(dá),經(jīng)SDS-PAGE分析,親和層析法純化融合蛋白,目的蛋白用Western blot法鑒定,ELISA檢測(cè)純化得到的融合蛋白的抗原活性。結(jié)果測(cè)序結(jié)果證實(shí)成功擴(kuò)增出目的基因β-hCG;酶切和測(cè)序結(jié)果證實(shí)pET-42a-β-hCG原核表達(dá)載體構(gòu)建成功;轉(zhuǎn)化后可以成功誘導(dǎo)并純化出大小與預(yù)期一致的蛋白;Western blot法及ELISA檢測(cè)證實(shí)純化后的β-hCG/GST融合蛋白具有良好的免疫原性。結(jié)論成功獲得β-hCG/GST融合蛋白,該蛋白具有良好的免疫原性,為以β-hCG為靶位的抗腫瘤主動(dòng)免疫治療研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 解放軍總醫(yī)院泌尿外科;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(30840094) 國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863)項(xiàng)目(2007AA02Z451)
【分類號(hào)】：R392.12
【正文快照】： 人絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotro-pin,hCG)是由胎盤合體滋養(yǎng)層細(xì)胞合成和分泌的一種糖蛋白激素,通常可以在婦女妊娠期間檢測(cè)到,在早期妊娠中起促進(jìn)胚泡發(fā)育、維持妊娠的作用。hCG是一種由α鏈和β鏈兩個(gè)亞基非共價(jià)鍵結(jié)合組成的異二聚體分子[1],其α亞基與促甲

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1252060