本文關(guān)鍵詞：剛地弓形蟲(chóng)致密顆粒蛋白GRA2全基因的原核重組表達(dá)

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【摘要】：目的克隆弓形蟲(chóng)RH株致密顆粒蛋白2(GRA2)的全長(zhǎng)基因,在大腸埃希菌工程菌中重組表達(dá)GST-HisGRA2融合蛋白。方法提取弓形蟲(chóng)總RNA,反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,PCR擴(kuò)增GRA2基因全長(zhǎng),與pET-41Ek/LIC載體通過(guò)基因重組直接連接,在大腸埃希菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中誘導(dǎo)表達(dá)重組融合蛋白,然后采用SDS-PAGE和Western blot鑒定重組蛋白產(chǎn)物。結(jié)果 PCR鑒定弓形蟲(chóng)GRA2全基因重組表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建正確;誘導(dǎo)表達(dá)的GSTHis-GRA2融合重組蛋白分子質(zhì)量單位為52ku,與預(yù)測(cè)值相符。結(jié)論本研究成功構(gòu)建了弓形蟲(chóng)GRA2全基因重組蛋白質(zhì)粒,該質(zhì)粒能表達(dá)GRA2蛋白,為研究GRA2與宿主細(xì)胞的相互作用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院北京熱帶醫(yī)學(xué)研究所;熱帶病防治研究北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.81071375,81301404) 北京市自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.7132042) 首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)-臨床科研合作基金項(xiàng)目(No.13JL16) 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院科研啟動(dòng)基金項(xiàng)目(No.2011_30yykyqd)
【分類(lèi)號(hào)】：R392.1
【正文快照】： 剛地弓形蟲(chóng)(Toxoplasma gondii)是一種細(xì)胞內(nèi)寄生原蟲(chóng),可引起人獸共患弓形蟲(chóng)病。人類(lèi)對(duì)弓形蟲(chóng)普遍易感,我國(guó)人群感染率為4.0%~9.0%,孕婦感染率高達(dá)6.6%~32.9%[1]。孕婦感染弓形蟲(chóng)可以引起胎兒嚴(yán)重的先天感染,導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎、畸形、智力障礙。對(duì)于免疫力低下者,如器官移植或AI

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1251260