發(fā)布時(shí)間：2017-11-24 01:13

  本文關(guān)鍵詞：ICAM-1編碼基因?qū)σ倚湍X炎DNA疫苗樹(shù)突狀細(xì)胞功能的影響

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【摘要】：目的:研究細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)編碼基因?qū)θ毡灸X炎(JE)DNA疫苗脾臟樹(shù)突狀細(xì)胞功能的影響。方法:套式RT-PCR法獲取BALB/c鼠ICAM-1編碼基因,構(gòu)建重組子pJME/ICAM-1和pICAM-1,脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染上述質(zhì)粒于CHO細(xì)胞,Western blot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞中目的蛋白表達(dá)。實(shí)驗(yàn)分5組,包括:pJME/ICAM-1、pJME+PICAM-1、pJME、JE滅活疫苗和pcDNA3.1(+)免疫組,以不同免疫原肌注免疫BALB/c小鼠,流式細(xì)胞儀檢測(cè)經(jīng)不同免疫原免疫鼠后脾臟DC表型、抗原吞噬功能以及混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)。結(jié)果:融合表達(dá)重組質(zhì)粒pJME/ICAM-1和單質(zhì)粒pICAM-1經(jīng)鑒定構(gòu)建正確。pJME/ICAM-1組CD11c+CD86+DC和CD11c+ICAM-1+DC比例分別為(6.92±1.40)%、(7.18±0.57)%,高于其它免疫組(均P0.05);pJME/ICAM-1和pJME+pICAM-1組DC表面CD80和MHCⅡ表達(dá)水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);pJME/ICAM-1與pJME+pICAM-1組內(nèi)吞能力明顯增強(qiáng),平均熒光強(qiáng)度分別為437.11±47.60、416.67±29.12,顯著高于其它組(P0.05)。比較不同免疫原對(duì)細(xì)胞分裂的作用,以pJME/ICAM-1組最強(qiáng),(73.69±7.32)%CD4+T細(xì)胞發(fā)生分裂,(45.40±2.57)%CD8+T細(xì)胞發(fā)生分裂,顯著高于對(duì)照組(P0.05)。結(jié)論:ICAM-1編碼基因能夠促進(jìn)JE DNA疫苗脾臟樹(shù)突狀細(xì)胞的成熟,能夠提供獨(dú)立或放大B7分子的協(xié)同刺激信號(hào)。
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院感染科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30471547) 遼寧省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(20042072) 遼寧省教育廳基礎(chǔ)研究計(jì)劃資助項(xiàng)目(05L498) 遼寧省教育廳高校科研基金資助項(xiàng)目(L2010589)
【分類號(hào)】：R392.4
【正文快照】： 日本腦炎(Japanese encephalitis,JE)DNA疫苗誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫和體液免疫仍達(dá)不到預(yù)期效果,一系列措施用來(lái)增強(qiáng)JE DNA疫苗的免疫效果[1]。目前越來(lái)越多的研究表明,樹(shù)突狀細(xì)胞(Dendriticcells,DCs)是DNA疫苗免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié),質(zhì)粒DNA可直接轉(zhuǎn)染注射部位抗原提呈細(xì)胞,質(zhì)粒DNA直

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本文編號(hào)：1220485