發(fā)布時(shí)間：2017-11-19 23:17

  本文關(guān)鍵詞：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞植入大鼠肝切模型中的分化研究

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【摘要】：目的:探討攜帶增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)標(biāo)記的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSC)植入肝部分切除大鼠體內(nèi)后,其在大鼠肝臟中的分化能力。方法:首先將人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)并且進(jìn)行表面標(biāo)志物檢測(cè),以攜帶EGFP標(biāo)記的慢病毒載體(lentiviral vector,LV)轉(zhuǎn)染HUC-MSC。將SD大鼠隨機(jī)分成3組:空白組、模型組及實(shí)驗(yàn)組,3組均建立大鼠肝切模型,空白組不注入HUC-MSC,模型組注入未標(biāo)記的HUC-MSC,實(shí)驗(yàn)組注入EGFP標(biāo)記的HUC-MSC。3個(gè)月后分離大鼠肝臟細(xì)胞,繼而進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。冰凍切片HE染色觀察病理結(jié)構(gòu),流式細(xì)胞儀檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞的純度及CD90在肝細(xì)胞中的表達(dá)量,熒光顯微鏡觀察EGFP在肝組織的表達(dá)。結(jié)果:病理切片顯示帶有EGFP的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在組織上表達(dá),其中一部分聚集于血管內(nèi),形成栓子,附在血管壁上;手術(shù)后各組大鼠的肝都有炎癥反應(yīng),但組織結(jié)構(gòu)良好,各組間未見明顯的形態(tài)學(xué)差異。HUC-MSC高表達(dá)CD44、CD29、CD105和CD90,不表達(dá)CD34、CD45、CD106、CD31、CD40和HLA-DR。流式結(jié)果顯示模型組EGFP的表達(dá)率為(0.27±0.21)%,實(shí)驗(yàn)組為(11.68±1.46)%,與模型組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。CD90的表達(dá)結(jié)果顯示模型組CD90的表達(dá)量較高,為(0.843±0.146)%,實(shí)驗(yàn)組低表達(dá)CD90,陽(yáng)性率為(0.026±0.017)%,與模型組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:人間充質(zhì)干細(xì)胞可以分化為肝細(xì)胞,LV介導(dǎo)EGFP標(biāo)記的人間充質(zhì)干細(xì)胞可以穩(wěn)定分化為肝細(xì)胞并且被檢測(cè)到,但是易于形成栓子,肝細(xì)胞低表達(dá)CD90,為以后干細(xì)胞的分化提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【作者單位】： 番禺區(qū)中心醫(yī)院外g，

本文編號(hào)：1205261