發(fā)布時間：2017-11-18 17:01

  本文關(guān)鍵詞：同一供者及不同供者的人胎盤MSCs與臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞復(fù)合培養(yǎng)的比較研究

  更多相關(guān)文章： 組織工程骨 血管化 人胎盤MSCs 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 復(fù)合培養(yǎng)

【摘要】：目的比較同一供者及不同供者的人胎盤MSCs(human placenta-derived MSCs,HPMSCs)與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)三維復(fù)合培養(yǎng)效果,為體外構(gòu)建三維血管化組織工程骨提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法取健康足月產(chǎn)婦自愿捐贈的胎盤及臍帶組織,采用Ⅳ型膠原酶消化和人淋巴細(xì)胞分層液密度梯度離心法分離培養(yǎng)HPMSCs,通過流式細(xì)胞學(xué)檢測細(xì)胞表型,取第2代細(xì)胞向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)鑒定;以Ⅰ型膠原酶消化分離培養(yǎng)HUVECs,通過Ⅷ因子相關(guān)抗原因子免疫組織化學(xué)染色進(jìn)行鑒定。實(shí)驗(yàn)分為兩組,A組取不同供者的第3代HUVECs和成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)3周的第3代HPMSCs以1∶1比例復(fù)合種植于膠原水凝膠,制備細(xì)胞-膠原水凝膠復(fù)合物;B組將同一供者的以上兩種細(xì)胞同法復(fù)合制備復(fù)合物。復(fù)合培養(yǎng)第1、3、5、7天取材,行CD31免疫熒光染色,于激光共聚焦顯微鏡下觀察其成血管傾向,測量復(fù)合物中的索道長度和節(jié)點(diǎn)數(shù),并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果經(jīng)鑒定,成功分離培養(yǎng)HPMSCs及HUVECs。CD31免疫熒光染色示,與A組相比,B組細(xì)胞-膠原水凝膠復(fù)合物中的HUVECs可在三維空間上較早、較好地伸展,在水凝膠內(nèi)部相互交織能力較強(qiáng),形成的索道更長,節(jié)點(diǎn)更多,網(wǎng)絡(luò)更密集。第7天時B組索道長度和節(jié)點(diǎn)數(shù)分別為(8.11±0.62)mm/mm2及(21.30±1.41)個/mm2,顯著優(yōu)于A組的(6.68±0.35)mm/mm2及(17.10±1.10)個/mm2,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.894,P=0.000;t=0.732,P=0.000)。結(jié)論將同一供者的HPMSCs與HUVECs體外復(fù)合種植于膠原水凝膠支架上,比不同供者來源的細(xì)胞形成的網(wǎng)絡(luò)成血管傾向更明顯,交織連續(xù)性好,層次豐富。
【作者單位】： 四川大學(xué)華西醫(yī)院骨科;
【基金】：國家教育部留學(xué)回國人員啟動基金資助項(xiàng)目[教外司留(2012)940號]~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 組織工程骨的血管化是目前研究骨缺損修復(fù)的熱點(diǎn)之一,選取具有良好生物相容性和生物功能性的種子細(xì)胞,較早地進(jìn)行血管化,是促進(jìn)植入體成功修復(fù)缺損的關(guān)鍵因素之一[1-3]。相比BMSCs,目前研究尚處于起步階段的人胎盤MSCs(human placenta-derivedMSCs,HPMSCs),具有取材簡便、創(chuàng)

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫濤,王松靈,朱頡,楊新林;人類涎腺細(xì)胞在幾種生物材料上的生長[J];北京口腔醫(yī)學(xué);2003年01期

2 祁軍;陳安民;郭風(fēng)勁;孫淑珍;謝柏臻;張偉凱;張樹威;;殼聚糖/納米羥基磷灰石分層復(fù)合支架的生物相容性研究[J];北京生物醫(yī)學(xué)工程;2008年01期

3 張梅梅,陳曉峰,王迎軍,趙娜如,張曉凱;CaO-P_2O_5-SiO_2系統(tǒng)溶膠—凝膠生物活性多孔材料的降解特性及生物活性研究[J];玻璃與搪瓷;2003年03期

4 謝肇,許建中,解志杰,羅飛,單建林,朱灝;離心管技術(shù)構(gòu)建的組織工程軟骨細(xì)胞生物學(xué)特性的研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2002年11期

5 潘勇;周躍;李長青;;新型組織工程椎間盤纖維環(huán)支架材料的制備和形態(tài)學(xué)觀察[J];重慶醫(yī)學(xué);2007年02期

6 王建,楊志明,解慧琪,秦廷武;培養(yǎng)軟骨、肌肉和骨蠟移植修復(fù)生長板缺損的實(shí)驗(yàn)研究[J];創(chuàng)傷外科雜志;2002年01期

7 辛雷;蘇佳燦;;人工骨修復(fù)材料的現(xiàn)狀與展望[J];創(chuàng)傷外科雜志;2011年03期

8 孫道冬,宋波,熊恩慶,孫丹寧,金錫御,方強(qiáng),李為兵,王勤,喬著意,李靖,蒙明生,康元上;兔膀胱移行上皮細(xì)胞構(gòu)建組織工程尿道的初步研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2003年22期

9 朱小軍;王栓科;趙斌;張海軍;;TGF-β1在羥基磷灰石多孔層修飾鎳鈦合金修復(fù)骨缺損中的表達(dá)及意義[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2009年14期

10 陳濱,裴國獻(xiàn),王珂,范義湘,金丹,魏寬海;山羊脛骨大段骨缺損的組織工程骨修復(fù)及放射性核素顯像監(jiān)測[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2002年11期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 朱明華;曾怡;劉程俊;王林;彭薔;秦廷武;楊軍;車茜;;玻璃化冷凍保存組織工程肌腱修復(fù)跟腱缺損的超微結(jié)構(gòu)影響研究[A];自主創(chuàng)新與持續(xù)增長第十一屆中國科協(xié)年會論文集（3）[C];2009年

2 柏濤;舒軍;;兔自體細(xì)胞-載體復(fù)合物修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[A];玉溪市第三屆骨科學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2007年

3 柏濤;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)表達(dá)軟骨細(xì)胞表型的研究進(jìn)展[A];玉溪市第三屆二次骨科學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2009年

4 王欣;劉寶林;華澤釗;;組織工程化皮膚低溫保存的重要性及研究進(jìn)展[A];第五屆全國低溫生物醫(yī)學(xué)及器械學(xué)術(shù)大會會議論文集[C];2006年

5 修忠標(biāo);林建華;;鹿茸多肽對兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體外凋亡的影響[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會脊柱醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會2008年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孟永春;膠原與生物活性玻璃作用機(jī)理及其復(fù)合骨修復(fù)材料的研究[D];華南理工大學(xué);2010年

2 莊穎;組織工程椎間盤的體外初步構(gòu)建及其生物學(xué)性能研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2011年

3 吳追樂;透骨消痛膠囊含藥血清對軟骨細(xì)胞活性與線粒體凋亡通路及細(xì)胞外基質(zhì)的影響[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2011年

4 李康杰;脫細(xì)胞骨基質(zhì)聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)動物骨缺損實(shí)驗(yàn)研究[D];延邊大學(xué);2011年

5 周煒;亞麻籽木脂素對動物消化代謝和生長的影響及機(jī)制探討[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

6 鐘鼎文;針刀松解法對頸椎病兔頸后肌纖維化影響的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2012年

7 孫安科;同種異體組織工程化軟骨的構(gòu)建及其應(yīng)用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2001年

8 陳希哲;含孔磷酸鈣陶瓷為支架基因轉(zhuǎn)染自體細(xì)胞成骨能力研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2001年

9 王東安;用于心血管醫(yī)療裝置的聚氨酯表面構(gòu)建與生物相容性研究[D];浙江大學(xué);2001年

10 張琪;周圍神經(jīng)缺損組織工程修復(fù)方法的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 盛英俊;不同持續(xù)時間的周期性壓力對構(gòu)建組織工程軟骨的影響[D];南京醫(yī)科大學(xué);2009年

2 呂彩霞;n-HA/CS復(fù)合材料的制備、性能表征及其應(yīng)用研究[D];河北大學(xué);2007年

3 鄭月涵;煙草浸潤液對人成骨細(xì)胞在鈦板上黏附增值的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

4 譚羽瑩;利用表面改性納米羥基磷灰石/PLGA材料構(gòu)建組織工程化骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2011年

5 王朝中;PDLLA/β-TCP/PRGD/NGF復(fù)合材料誘導(dǎo)PC12細(xì)胞ERK1/2蛋白磷酸化表達(dá)的研究[D];武漢理工大學(xué);2011年

6 韋海榮;豬膀胱平滑肌細(xì)胞和移行上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)及支架復(fù)合物的構(gòu)建[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

7 李俊華;針刺對大鼠骨骼肌挫傷后組織修復(fù)的影響[D];北京體育大學(xué);2011年

8 劉揚(yáng);組織工程化構(gòu)建骨支架材料—無機(jī)活性元素支架材料的機(jī)械強(qiáng)度的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

9 姜曉鑫;載骨碎補(bǔ)磷酸鈣骨水泥的研究[D];西南交通大學(xué);2011年

10 曹基婷;骨髓基質(zhì)干細(xì)胞源性成骨細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞復(fù)合同種異體凍干顆粒骨修復(fù)大鼠橈骨節(jié)段性骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];華北煤炭醫(yī)學(xué)院;2010年

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曾憲利,裴國獻(xiàn),金丹,唐光輝,王學(xué)明,劉曉霞,曾俊嶺,張文高;血管化組織工程骨修復(fù)獼猴脛骨缺損模型的建立及初步觀察[J];中華創(chuàng)傷骨科雜志;2005年04期

2 高振華;卜令學(xué);袁榮濤;馮元勇;王玲玲;李寧毅;;血管內(nèi)皮祖細(xì)胞對組織工程骨成骨能力的影響[J];上�？谇会t(yī)學(xué);2011年04期

3 馬紅梅;鄒進(jìn);王躍中;艾紅軍;楊向紅;;人成骨細(xì)胞與臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞直接混合培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[J];口腔醫(yī)學(xué);2007年06期

4 羊書勇;金芳;張建設(shè);鄭維銀;李晨軍;朱宏衛(wèi);李焰;;富血小板血漿在組織工程骨成骨中的作用研究[J];西南國防醫(yī)藥;2011年05期

5 羅飛,許建中,王序全,謝肇,代飛,何清義,尹芝華;自體血清對牛血清適應(yīng)性人間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2005年16期

6 馮琳琳;王金成;;骨髓基質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)和保存方法[J];中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)半月刊);2008年03期

7 卜令學(xué);高振華;荊恒;陳立強(qiáng);劉鳳芝;李寧毅;;犬骨髓基質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化及細(xì)胞片層的制備[J];現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志;2010年05期

8 楊麗霞;郭瑞威;石燕昆;齊峰;郭傳明;;內(nèi)皮細(xì)胞中血管緊張肽Ⅱ?qū)?nèi)皮型一氧化氮合酶表達(dá)的影響[J];中國急救醫(yī)學(xué);2006年01期

9 胡學(xué)峰;洪建明;王臻;許宋峰;王林;李愛民;;一種生物陶瓷體內(nèi)血管化動物模型的建立[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2006年01期

10 張玉英;李勇;蔣霞;范維琥;;低氧上調(diào)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞膠原ⅩⅧ和內(nèi)皮抑素的表達(dá)[J];復(fù)旦學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2007年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 斯曉燕;趙永強(qiáng);;低密度脂蛋白、氧化型低密度脂蛋白、高密度脂蛋白對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凝血酶調(diào)節(jié)蛋白、內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體表達(dá)的影響[A];第十一屆全國血栓與止血學(xué)術(shù)會議暨血栓栓塞性疾�。ㄑㄅc止血）基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文摘要匯編及學(xué)習(xí)班講義[C];2007年

2 陳麗華;劉雪松;金伯泉;;CD226分子誘導(dǎo)HUVEC胞漿[Ca2~+]i變化的研究[A];中國免疫學(xué)會第四屆學(xué)術(shù)大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

3 陳佳;宋瑋;張英;路巖;程云鵬;劉紅陽;米芋玫;任麗麗;姜一農(nóng);;腎素前體和腎素(前體)受體在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中的作用及機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會第11次心血管病學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

4 馮志民;張曉峰;王宏芳;豐美福;;人NK細(xì)胞對同種和異種內(nèi)皮細(xì)胞MHCI類分子的差異識別[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會第七次會議論文摘要匯編[C];1999年

5 林海龍;陳永平;鄭明華;胡萬里;許爛漫;黃榆;;大鼠肝細(xì)胞與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞混合共微囊化的體外研究[A];第十七次全國中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

6 簡月奎;田曉濱;;不同方法顯像骨組織微血管的對比研究[A];2009“泰山杯”全國骨科青年科技創(chuàng)新論壇暨優(yōu)秀論文評選論文選集[C];2009年

7 劉澲雯;高鋒;;體外血管研究模型——人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞常規(guī)化培養(yǎng)方法的建立[A];全國臨床免疫檢驗(yàn)研討會暨第六屆全國臨床免疫學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

8 王曉靜;劉擁軍;盧士紅;梁琳慧;王晗;韓忠朝;;人促血液血管細(xì)胞生成素對造血干細(xì)胞與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞之間粘附功能的影響[A];第10屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會議論文摘要匯編[C];2005年

9 王穎智;高鋒;;原代培養(yǎng)HUVEC電轉(zhuǎn)導(dǎo)siRNA進(jìn)行RNA干擾方法的建立[A];全國臨床免疫檢驗(yàn)研討會暨第六屆全國臨床免疫學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

10 仲悅嬌;陳寶安;黃成垠;李翠萍;高峰;費(fèi)菲;裴孝平;高沖;丁家華;孫耘玉;程堅(jiān);王駿;趙剛;馬燕;;血小板衍生膜微粒對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖和凋亡的影響[A];第11次中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會議論文匯編[C];2007年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 記者姚春雨通訊員錢勇;人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞重建成功[N];健康報;2003年

2 通訊員 錢勇 記者 范又;我國成功重建永生化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞[N];光明日報;2003年

3 錢勇;永生化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞重建成功[N];中國醫(yī)藥報;2003年

4 記者唐先武 特約記者錢勇;永生化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞重建成功[N];科技日報;2003年

5 徐峰;腫瘤與血管生成息息相關(guān)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2001年

6 靜雨;用炎癥來阻止腫瘤生長[N];中國醫(yī)藥報;2003年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姜曉銳;大鼠雪旺細(xì)胞與成骨細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)構(gòu)建神經(jīng)化組織工程骨的前期研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年

2 劉玉鳳;超聲介導(dǎo)微泡造影劑對細(xì)胞和微血管以及基因在HUVEC內(nèi)轉(zhuǎn)染率的影響的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

3 劉偉;腎上腺髓質(zhì)素對LPS抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞TFPI基因表達(dá)的影響及其分子機(jī)制[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

4 姜濤;人BMP-2基因轉(zhuǎn)染人脂肪組織源性干細(xì)胞誘導(dǎo)體內(nèi)成骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2007年

5 崔培林;褪黑素對體外培養(yǎng)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖和凋亡的影響[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

6 陳東;構(gòu)建組織工程化凝膠及體內(nèi)誘導(dǎo)骨壞死血管化的實(shí)驗(yàn)研究[D];華中科技大學(xué);2012年

7 陳濱;腺病毒介導(dǎo)VEGF_（165）基因和eGFP基因共轉(zhuǎn)染hBMSc對其體外增殖分化影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2006年

8 梁文杰;豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化后免疫原性的實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

9 殷學(xué)民;下頜骨缺損骨瓣修復(fù)中受區(qū)的應(yīng)用解剖學(xué)研究[D];中國人民解放軍第一軍醫(yī)大學(xué);2003年

10 陳俊穎;巴馬香豬皮膚比較生物學(xué)特性及其無細(xì)胞真皮的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 肖仕輝;大網(wǎng)膜包裹構(gòu)建血管化組織工程骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2012年

2 曹艷云;不同新生隱球菌菌株對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

3 屈順林;NOX4在人血管細(xì)胞中的表達(dá)及其在內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中的作用[D];南華大學(xué);2005年

4 曹煒鵬;脈沖電磁場對小鼠胚胎干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

5 吳歡歡;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞構(gòu)建組織工程骨的量效關(guān)系研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

6 王玲玲;應(yīng)用骨髓基質(zhì)細(xì)胞片層構(gòu)建組織工程骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2011年

7 靳慧勇;用于組織工程骨成骨機(jī)制研究的小鼠模型的建立及其初步應(yīng)用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

8 陳國武;納米網(wǎng)孔n-HA/PA66/成骨細(xì)胞/VEGF組織工程骨的構(gòu)建[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

9 劉春曉;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)構(gòu)建組織工程骨顆粒的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

10 何春耒;腺病毒介導(dǎo)的BMP-2基因轉(zhuǎn)染BMSCs復(fù)合納米羥基磷灰石體外構(gòu)建組織工程骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2010年

，

本文編號：1200474