本文關(guān)鍵詞：新西蘭兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞-慶大霉素-藻酸鈣三維緩釋培養(yǎng)體系的構(gòu)建及體外評價

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【摘要】：目的構(gòu)建新西蘭兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)-慶大霉素-藻酸鈣三維緩釋培養(yǎng)體系,研究BMSCs的生長和分化情況。方法分別構(gòu)建BMSCs-藻酸鈣三維培養(yǎng)體系(W組)及BMSCs-慶大霉素-藻酸鈣三維緩釋培養(yǎng)體系(U組),在37℃、飽和濕度、5%CO_2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),培養(yǎng)液為高糖DMEM(含15%胎牛血清、10ng/mL轉(zhuǎn)化生長因子β_1),隔日換液,觀察細(xì)胞形態(tài)變化及凝珠形態(tài)變化。第2、4、6周對凝珠進(jìn)行H-E染色、甲苯胺藍(lán)染色及Ⅱ型膠原染色。結(jié)果兩組三維凝珠培養(yǎng)第10天局部有細(xì)胞團(tuán)簇形成;第21天可見大量細(xì)胞團(tuán)簇形成,BMSCs多保持圓球形或類球形。兩組細(xì)胞增殖及生長能力差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。培養(yǎng)2周,兩組凝珠甲苯胺藍(lán)染色均呈陽性,但無明顯細(xì)胞外基質(zhì)形成,Ⅱ型膠原抗體染色均呈弱陽性;培養(yǎng)4周,兩組凝珠甲苯胺藍(lán)染色均顯示位于細(xì)胞團(tuán)塊外周的細(xì)胞呈藍(lán)色,中央的細(xì)胞染色不明顯,細(xì)胞團(tuán)外周藍(lán)色染色物質(zhì)較少,中央有較多紫紅色物質(zhì),Ⅱ型膠原抗體染色均呈強陽性。H-E染色、甲苯胺藍(lán)染色及Ⅱ型膠原抗體染色均未發(fā)現(xiàn)兩組BMSCs的轉(zhuǎn)化生長有差異,增殖數(shù)量差異也無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論適量的慶大霉素局部緩釋并未明顯影響B(tài)MSCs的生長及轉(zhuǎn)化,又可達(dá)到最小抑菌濃度;慶大霉素對BMSCs及軟骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響有待進(jìn)一步探討。
【作者單位】： 第二軍醫(yī)大學(xué)長海醫(yī)院骨科;解放軍169中心醫(yī)院骨科;
【基金】：上海市自然科學(xué)基金(10411960400)~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 兔骨髓l句充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal StemCells，，BMSCs卜藻酸鈣三維培養(yǎng)體系的構(gòu)建已有很多成功的范例，通過三維培養(yǎng)更易誘導(dǎo)細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化生長，逐步形成新生軟骨，以達(dá)到修復(fù)軟骨缺損的目的!’1〕。我們前期的實驗已成功研制出慶大霉素一藻酸鈣緩釋微球，并測定了

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本文編號：1195930