巴爾通體HBPC蛋白原核重組表達及抗原性研究
本文關(guān)鍵詞:巴爾通體HBPC蛋白原核重組表達及抗原性研究
【摘要】:為了尋找可用于巴爾通體(Bartonella)檢測的特異性抗原,利用PCR方法從巴爾通體廈門分離株(B.tribocorum_XM)的基因組DNA中擴增出血紅素結(jié)合蛋白C(HBPC)蛋白基因,并將該基因的編碼區(qū)克隆到pGEX-4T-1原核表達載體中,構(gòu)建帶GST標簽的融合蛋白重組表達載體,并轉(zhuǎn)化大腸桿菌(Escherichia coli DH5α),誘導表達GST-HBPC,通過親和層析技術(shù)純化GST-HBPC.最后運用蛋白質(zhì)斑點印跡試驗(Western blot)和間接ELISA法檢驗GST-HBPC是否具有抗原性.結(jié)果表明,所構(gòu)建的表達載體可在大腸桿菌中大量表達GST-HBPC,Western blot和間接ELISA顯示GST-HBPC能夠特異性地與感染動物血液樣本發(fā)生免疫反應.因此,體外重組的巴爾通體抗原蛋白HBPC可作為潛在的抗原用于巴爾通體血清學免疫檢測.
【作者單位】: 廈門市海滄區(qū)疾病預防控制中心;廈門大學藥學院;
【基金】:廈門市科技計劃項目(WZK-0629)
【分類號】:R378
【正文快照】: 巴爾通體(Bartonella)屬于革蘭氏染色陰性寄生桿菌.巴爾通體病是一類人畜共患病,人畜感染巴爾通體會表現(xiàn)各種病征,如貓抓病、卡里翁氏病、心內(nèi)膜炎、桿菌性血管瘤和慢性巴爾通體血癥等,同時可能引發(fā)視網(wǎng)膜炎、腦炎、腎小球腎炎和肺炎等并發(fā)癥,給人畜健康帶來巨大危害[1-2].近
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本文編號:1176031
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