巴爾通體HBPC蛋白原核重組表達(dá)及抗原性研究
本文關(guān)鍵詞:巴爾通體HBPC蛋白原核重組表達(dá)及抗原性研究
【摘要】:為了尋找可用于巴爾通體(Bartonella)檢測(cè)的特異性抗原,利用PCR方法從巴爾通體廈門分離株(B.tribocorum_XM)的基因組DNA中擴(kuò)增出血紅素結(jié)合蛋白C(HBPC)蛋白基因,并將該基因的編碼區(qū)克隆到pGEX-4T-1原核表達(dá)載體中,構(gòu)建帶GST標(biāo)簽的融合蛋白重組表達(dá)載體,并轉(zhuǎn)化大腸桿菌(Escherichia coli DH5α),誘導(dǎo)表達(dá)GST-HBPC,通過親和層析技術(shù)純化GST-HBPC.最后運(yùn)用蛋白質(zhì)斑點(diǎn)印跡試驗(yàn)(Western blot)和間接ELISA法檢驗(yàn)GST-HBPC是否具有抗原性.結(jié)果表明,所構(gòu)建的表達(dá)載體可在大腸桿菌中大量表達(dá)GST-HBPC,Western blot和間接ELISA顯示GST-HBPC能夠特異性地與感染動(dòng)物血液樣本發(fā)生免疫反應(yīng).因此,體外重組的巴爾通體抗原蛋白HBPC可作為潛在的抗原用于巴爾通體血清學(xué)免疫檢測(cè).
【作者單位】: 廈門市海滄區(qū)疾病預(yù)防控制中心;廈門大學(xué)藥學(xué)院;
【基金】:廈門市科技計(jì)劃項(xiàng)目(WZK-0629)
【分類號(hào)】:R378
【正文快照】: 巴爾通體(Bartonella)屬于革蘭氏染色陰性寄生桿菌.巴爾通體病是一類人畜共患病,人畜感染巴爾通體會(huì)表現(xiàn)各種病征,如貓抓病、卡里翁氏病、心內(nèi)膜炎、桿菌性血管瘤和慢性巴爾通體血癥等,同時(shí)可能引發(fā)視網(wǎng)膜炎、腦炎、腎小球腎炎和肺炎等并發(fā)癥,給人畜健康帶來巨大危害[1-2].近
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本文編號(hào):1176031
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