發(fā)布時間：2017-11-11 14:31

  本文關(guān)鍵詞：稀有密碼子對人源Id2基因表達(dá)的影響

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【摘要】：目的:通過對人Id2基因的稀有密碼子進(jìn)行突變并構(gòu)建原核表達(dá)重組質(zhì)粒,在大腸桿菌(escherichia coli,E.coli)中表達(dá)Id2蛋白,分析稀有密碼子對Id2基因表達(dá)的影響。方法:PCR擴(kuò)增突變Id2基因序列,然后轉(zhuǎn)入E.coli BL21中進(jìn)行表達(dá),利用鎳離子親和層析、離子交換層析及分子篩純化。結(jié)果:正確構(gòu)建了Id2基因的基因突變表達(dá)質(zhì)粒,基因突變表達(dá)的Id2蛋白在E.coli BL21中為可溶性上清表達(dá),成功純化了目的蛋白,且分子篩結(jié)果顯示其在溶液中呈現(xiàn)二聚體狀態(tài)。結(jié)論:稀有密碼子對Id2蛋白在E.coli BL21中大量可溶性上清表達(dá)有重要影響。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)感染性疾病分子生物學(xué)重點實驗室;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院檢驗科;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(編號:30970563)
【分類號】：R341;Q78
【正文快照】： 分化抑制因子(inhibitor of DNA binding and/ordifferentiation,Id)屬于核轉(zhuǎn)錄因子helix-loop-helix(HLH)家族[1]。HLH蛋白質(zhì)家族可通過2個螺旋互相作用形成二聚體,進(jìn)而調(diào)控目的基因表達(dá)。HLH蛋白可分為3類:①bHLH蛋白;②bHLH-zip蛋白;③dnHLH蛋白[2]。bHLH蛋白的N端有一段堿

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本文編號：1171806