本文關(guān)鍵詞：用酶解法制備殼寡糖及其對(duì)機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)作用

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【摘要】：目的:研究本課題組酶解制備的主要含3-7聚合度殼寡糖(COS)對(duì)機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)作用。方法:利用本課題組分離的高活性殼聚糖酶通過酶水解法制備殼寡糖,HPLC法對(duì)殼寡糖的成分進(jìn)行鑒定,并用異硫氰酸熒光素(FITC)將殼寡糖進(jìn)行熒光標(biāo)記得到FITC-COS,研究小鼠腹腔巨噬細(xì)胞對(duì)殼寡糖的吞噬作用及其與Toll樣受體4(TLR4)的關(guān)系,進(jìn)一步研究了不同濃度殼寡糖對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的增殖,吞噬中性紅能力及分泌TNF-α能力的影響,并對(duì)小鼠灌胃不同劑量的殼寡糖,研究了殼寡糖對(duì)小鼠血清IgG和IgM含量及小鼠胸腺、脾臟指數(shù)的影響。結(jié)果:HPLC分析結(jié)果顯示殼聚糖酶水解法制備的COS主要為3-7單糖聚合度的寡糖。將FITC-COS作用于小鼠腹腔巨噬細(xì)胞不同時(shí)間后,熒光顯微鏡觀察結(jié)果表明巨噬細(xì)胞能夠吞噬COS,隨著時(shí)間的延長吞噬COS的量增加,TLR4單克隆抗體預(yù)處理巨噬細(xì)胞1小時(shí)后再加入FITC-COS,巨噬細(xì)胞對(duì)COS的吞噬作用幾乎完全被抑制。COS被巨噬細(xì)胞吞噬后可顯著增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能,刺激巨噬細(xì)胞分泌TNF-α。體內(nèi)研究結(jié)果表明小鼠灌胃COS能夠顯著增加小鼠的脾臟指數(shù),增加血清中IgG的含量,對(duì)胸腺指數(shù)和血清中IgM的含量沒有顯著影響。結(jié)論:殼寡糖(3-7聚合度)能夠被巨噬細(xì)胞吞噬,進(jìn)而激活巨噬細(xì)胞,具有較好的體外、體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)功能,殼寡糖對(duì)巨噬細(xì)胞的激活是通過細(xì)胞表面TLR4受體介導(dǎo)的。
【作者單位】： 中國海洋大學(xué)海洋生命學(xué)院;江蘇省淮海工學(xué)院海洋學(xué)院;
【基金】：山東省青島市科技項(xiàng)目支持[12-1-4-1-(23)-jch]
【分類號(hào)】：R392.1
【正文快照】： 殼寡糖(COS)是殼聚糖的降解產(chǎn)物,由2～10個(gè)氨基葡萄糖通過β-1,4-糖苷鍵連接而成。殼寡糖作為自然界中唯一大量存在的堿性氨基寡糖,由于具有分子量低、水溶性好、易吸收等特性,在提高免疫力、抗腫瘤、抗菌、促進(jìn)傷口愈合等方面具有較好的生物學(xué)功能[1,2]。近年來,隨著研究的深

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本文編號(hào)：1163219