本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)的CAV1過表達(dá)對HL-60細(xì)胞增殖與凋亡的影響

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【摘要】：本研究旨在探討慢病毒介導(dǎo)的CAV1過表達(dá)對HL-60細(xì)胞增殖與凋亡的影響。構(gòu)建慢病毒重組表達(dá)載體pcDNA-EF1-CAV1,并與pPACK包裝質(zhì)粒混合物共轉(zhuǎn)染至293TN細(xì)胞后,收集病毒液感染HL-60細(xì)胞,使CAV1基因在細(xì)胞中穩(wěn)定轉(zhuǎn)染并高表達(dá)。采用Western blot方法評價轉(zhuǎn)染后HL-60 CAV1蛋白表達(dá)情況。采用CCK-8法、流式細(xì)胞術(shù)分別檢測轉(zhuǎn)染前后HL-60細(xì)胞的增殖活性和凋亡情況。結(jié)果表明:PCR陽性克隆篩選及核苷酸測序結(jié)果證實CAV1基因正確插入表達(dá)載體pcDNA-EF1-GFP中。重組慢病毒顆粒Lv-CAV1成功轉(zhuǎn)染HL-60細(xì)胞,轉(zhuǎn)染率達(dá)90%。Western blot檢測結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染后48 h HL-60細(xì)胞中CAV1蛋白表達(dá)明顯增高。CCK-8檢測結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染后48 h HL-60細(xì)胞增殖活性降低(P0.05),流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染后HL-60細(xì)胞凋亡率明顯增加(P0.01)。結(jié)論:CAV1過表達(dá)對HL-60細(xì)胞具有抑制細(xì)胞的增殖活性、促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用。
【作者單位】： 佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生化實驗室;牡丹江醫(yī)學(xué)院研究生處;
【基金】：國家自然基金項目(編號81070428) 黑龍江省自然科學(xué)基金項目(編號D201024) 黑龍江省衛(wèi)生廳科研課題項目(編號2010-484) 佳木斯大學(xué)重點科研項目(編號2010-228) 黑龍江省博士后科研啟動項目(LBH-Q12005)
【分類號】：R341
【正文快照】： 急性髓系白血病(acute myelogenous leukemia,AML)是造血干細(xì)胞異常克隆增生導(dǎo)致的一種惡性腫瘤性疾病。近年來AML的治療雖然取得了長足的進(jìn)步,但仍有20%以上的白血病患者難以完全緩解,最終復(fù)發(fā)、死亡。Caveolae是細(xì)胞膜上直徑為50-100 nm燒瓶狀的囊泡結(jié)構(gòu),參與細(xì)胞的胞吞、

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1153847