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慢病毒介導(dǎo)的降鈣素基因相關(guān)肽轉(zhuǎn)染對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞內(nèi)皮分化的影響

發(fā)布時間:2017-11-05 20:04

  本文關(guān)鍵詞:慢病毒介導(dǎo)的降鈣素基因相關(guān)肽轉(zhuǎn)染對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞內(nèi)皮分化的影響


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【摘要】:目的:研究慢病毒介導(dǎo)的降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)基因轉(zhuǎn)染對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)內(nèi)皮分化功能的影響。方法:用密度梯度離心結(jié)合貼壁法培養(yǎng)大鼠骨髓MSCs,攜帶CGRP的慢病毒載體轉(zhuǎn)染MSCs,未轉(zhuǎn)染MSCs作為對照,應(yīng)用ELISA法檢測CGRP蛋白表達;實驗分為轉(zhuǎn)染Lenti-CGRP的MSCs(CGRP)組、轉(zhuǎn)染Lenti-CGRP的MSCs+CGRP受體拮抗劑(CGRP8-37)組(CGRP+CGRP8-37)及未經(jīng)轉(zhuǎn)染的對照組。應(yīng)用免疫細胞化學(xué)檢測細胞CD31和Ⅷ因子相關(guān)抗原的表達以鑒定其分化能力;細胞計數(shù)法觀察轉(zhuǎn)染CGRP后MSCs增殖的影響;Matrigel實驗觀察轉(zhuǎn)染CGRP對MSCs形成管腔樣結(jié)構(gòu)能力的影響。結(jié)果:MSCs轉(zhuǎn)染CGRP基因經(jīng)誘導(dǎo)分化后的CD31和Ⅷ因子相關(guān)抗原陽性細胞數(shù)量增多,與對照組相比有顯著差異(P0.05);轉(zhuǎn)染CGRP組細胞數(shù)量增長較快,與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);Matrigel實驗顯示轉(zhuǎn)染CGRP組細胞微血管新生明顯,與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。而CGRP+CGRP8-37組上述作用明顯被抑制。結(jié)論:轉(zhuǎn)染CGRP基因能促進MSCs向內(nèi)皮分化,并能促進內(nèi)皮細胞增殖,在一定的條件下,可促進微血管新生。
【作者單位】: 遵義醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科;遵義醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院急診科;曼尼托巴大學(xué);
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81060014)
【分類號】:R341
【正文快照】: 急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)是心肌缺血性壞死,為在冠狀動脈病變的基礎(chǔ)上發(fā)生的冠脈血供急劇減少或中斷,使相應(yīng)心肌持久地急性缺血導(dǎo)致心肌壞死。經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(percutaneous coronary intervention,PCI)雖可以挽救部分頻臨壞死的心肌細胞,但對長期

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