本文關鍵詞：miR-125b通過靶向抑制Smad4調控骨髓間充質干細胞成骨分化

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【摘要】：目的:研究miR-125b是否通過調控其預測的靶基因Smad4表達而調節(jié)骨髓間充質干細胞(MSCs)成骨分化。方法:構建Smad4 3'-UTR-熒光素酶報告載體,通過熒光素酶報告檢測觀察miR-125b對Smad4 3'-UTR-熒光素酶活性的影響;分離培養(yǎng)人骨髓MSCs,在MSCs中轉染miR-125b mimics并進行成骨誘導,采用熒光定量PCR(qRT-PCR)和Western印跡檢測Smad4表達水平;Smad4 siRNA轉染MSCs并進行成骨誘導,通過檢測堿性磷酸酶(AKP)活性及RUNX2 mRNA表達水平變化考察Smad4下調對MSCs成骨分化的影響。結果:雙熒光素報告檢測顯示miR-125b能特異性地與Smad4 mRNA的3'-UTR結合,抑制其熒光素酶活性(P0.05)。過表達miR-125b能抑制MSCs成骨分化過程中Smad4表達水平。干擾Smad4表達能抑制AKP活性及RUNX2 mRNA表達水平,它能部分模擬miR-125b調控MSCs成骨分化的功能。結論:miR-125b通過抑制靶基因Smad4的表達調控MSCs成骨分化。
【作者單位】： 南華大學附屬南華醫(yī)院骨科;廣州醫(yī)學院附屬腫瘤醫(yī)院腫瘤研究所;
【基金】：國家自然科學基金(81101526)~~
【分類號】：R363
【正文快照】： m i R N A s是近十年來發(fā)現的一類具有調控功能的19~25個核苷酸組成的非編碼小分子RNA。成熟miRNA與靶基因mRNA的3'-UTR結合抑制靶m R N A的翻譯或降解靶m R N A,從而實現基因表達的轉錄后調控[1]。miRNAs參與生命活動過程中一系列的重要進程,包括生長發(fā)育、細胞增殖、分化、

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