本文關鍵詞：人水甘油通道蛋白9重組質粒的構建及表達

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【摘要】：目的:構建人水甘油通道蛋白9(aquaglyceroporin9,AQP9)重組質粒,并檢測其融合蛋白在真核細胞COS-7中的表達,為闡明AQP9在非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的作用奠定基礎。方法:通過RT-PCR方法從人肝臟組織中獲得AQP9基因,插入pEGFP-N1質粒,構建重組質粒pEGFP-N1-AQP9,轉染COS-7細胞,通過熒光顯微鏡檢測其轉染情況,RT-PCR和Western blot檢測AQP9在真核細胞中的表達。結果:PCR及酶切鑒定顯示插入人AQP9大小正確。測序鑒定顯示,1個堿基發(fā)生突變,45位:A→G,為無義突變。通過RT-PCR和Western blot檢測到AQP9表達,說明AQP9基因在COS-7細胞中表達并與綠色熒光蛋白融合,且具有免疫原性。結論:成功構建了pEGFP-N1-AQP9重組質粒,并在COS-7細胞中表達,為進一步研究AQP9在NAFLD發(fā)生發(fā)展中的作用奠定基礎。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院消化內科;
【關鍵詞】： 水甘油通道蛋白 非酒精性脂肪肝病 重組質粒
【基金】：國家自然科學基金資助項目(編號:81070318) 重慶市衛(wèi)生局科研資助項目(編號:渝衛(wèi)科教2010-2-100)
【分類號】：R341
【正文快照】： 隨著我國人民生活水平提高和西方化的飲食方式,非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver dis-ease,NAFLD)患病率迅速增加,已經成為主要消化系統(tǒng)疾病之一[1-2]。NAFLD與脂肪重新分布有關,而水甘油通道蛋白9(aquaglyceroporin9,AQP9)正是參與脂肪動員運輸和肝臟攝取的重要膜

【共引文獻】

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本文編號：1134721