本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子ChREBP-α增強(qiáng)小鼠原代肝細(xì)胞的脂質(zhì)合成能力

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【摘要】：目的構(gòu)建含轉(zhuǎn)錄因子ChREBP-α基因的重組腺病毒載體,檢測其在小鼠原代肝細(xì)胞中的表達(dá)及其對脂質(zhì)合成的調(diào)節(jié)作用。方法將ChREBP-αcDNA克隆到穿梭質(zhì)粒pShuttle-CMV載體,與pAdEasy質(zhì)粒在大腸桿菌BJ5183中同源重組,獲得腺病毒載體pAd-ChREBP-α,在293A細(xì)胞中進(jìn)行病毒的包裝和擴(kuò)增,檢測病毒的滴度;將腺病毒Ad-ChREBP-α感染小鼠原代肝細(xì)胞,用實(shí)時(shí)熒光定量PCR及蛋白質(zhì)印跡法檢測ChREBP-α的表達(dá),實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測ChREBP-α靶基因LPK mRNA的表達(dá)。用核素14 C示蹤法測定肝細(xì)胞的脂質(zhì)合成速率。結(jié)果成功制備了ChREBP-α重組腺病毒,利用其在原代肝細(xì)胞過表達(dá)ChREBP-α,可顯著上調(diào)靶基因LPK的表達(dá),并增強(qiáng)肝細(xì)胞的脂質(zhì)合成速率。結(jié)論成功制備了具有生物學(xué)活性、能在原代肝細(xì)胞中過表達(dá)的ChREBP-α重組腺病毒,為研究ChREBP-α的糖脂代謝調(diào)控作用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 第二軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部病理生理學(xué)教研室;第二軍醫(yī)大學(xué)長海醫(yī)院內(nèi)分泌科;第二軍醫(yī)大學(xué)長海醫(yī)院普通外科;
【關(guān)鍵詞】： 脂代謝障礙 重組腺病毒 肝細(xì)胞 碳水化合物反應(yīng)元件結(jié)合蛋白
【基金】：國家杰出青年科學(xué)基金(31025013) 國家自然科學(xué)基金(81100614)~~
【分類號】：R363
【正文快照】： 肝臟是體內(nèi)糖脂代謝的重要場所。碳水化合物反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(carbohydrate response elementbinding protein,ChREBP)是調(diào)控肝臟糖脂代謝的重要轉(zhuǎn)錄因子之一,能夠與L型丙酮酸激酶(L-typepyruvate kinase,LPK)等靶基因啟動子區(qū)的碳水化合物反應(yīng)元件(carbohydrate response ele

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3 ;[J];;年期

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5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

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1 汪琦;朱舟;王偉;;大鼠縫隙連接蛋白Connexin 43的shRNA重組腺病毒載體的構(gòu)建與鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

2 郭浩;彭毅志;辛海明;;小鼠CCR7基因重組腺病毒的構(gòu)建與鑒定[A];第八屆全國燒傷外科學(xué)年會論文匯編[C];2007年

3 樊守艷;梁平;張曉燕;;小鼠FAM3C基因重組腺病毒載體的構(gòu)建與鑒定[A];中南地區(qū)第八屆生理學(xué)學(xué)術(shù)大會論文摘要匯編[C];2012年

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5 郭浩;彭毅志;辛海明;;小鼠CCR7基因重組腺病毒的構(gòu)建與鑒定[A];第八屆西南五省一市燒傷整形學(xué)術(shù)會議暨貴州省醫(yī)學(xué)會燒傷整形分會2010年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2010年

6 辛海明;彭毅志;郭浩;袁志強(qiáng);;小鼠CCR7腺病毒體外轉(zhuǎn)染對未成熟樹突狀細(xì)胞的影響[A];第八屆西南五省一市燒傷整形學(xué)術(shù)會議暨貴州省醫(yī)學(xué)會燒傷整形分會2010年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2010年

7 張睿娟;楊林花;周劍峰;;類果蠅分節(jié)因子4反義腺病毒載體的構(gòu)建和鑒定[A];第12屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會議論文摘要[C];2009年

8 郭景茹;楊煥民;計(jì)紅;臧琳;郭爽;王忠偉;張旭;;Wistar大鼠HSP70基因重組腺病毒載體的構(gòu)建及其病毒制備[A];全國動物生理生化第十一次學(xué)術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2010年

9 陸才生;馬會慧;魏秋靜;古潔若;;CTLA4Ig基因重組腺病毒載體的構(gòu)建及其功能測定[A];第十屆全國風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2005年

10 梁紹燕;金先慶;羅慶;;結(jié)締組織生長因子的克隆及其重組腺病毒的構(gòu)建[A];中國西南地區(qū)第九屆小兒科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

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1 夏天;重組腺病毒AdCD40Ig聯(lián)合供體靜息B淋巴細(xì)胞預(yù)處理誘導(dǎo)小鼠皮膚移植耐受的研究[D];四川大學(xué);2004年

2 董磊;以前列腺干細(xì)胞抗原為靶點(diǎn)的重組蛋白及重組腺病毒載體疫苗的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2011年

3 葛良鵬;提高腺病毒對豬皮膚組織轉(zhuǎn)染效率的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2008年

4 詹鷹;構(gòu)建siRNA抑制陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞PDE5基因表達(dá)治療ED的研究[D];華中科技大學(xué);2007年

5 曹慧青;共表達(dá)CD/TK雙自殺基因?qū)ρ芷交〖?xì)胞增殖的影響[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2001年

6 譚燦;hCUL4A過表達(dá)對缺氧/缺血—再供氧/再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制初探[D];中南大學(xué);2012年

7 馬春玲;SARS-CoV N蛋白免疫原性和致病性的初步研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2006年

8 樊彩斌;IKK2dn轉(zhuǎn)染并負(fù)載供體抗原的受體未成熟樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)免疫耐受的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2008年

9 余資江;noggin基因修飾神經(jīng)干細(xì)胞移植治療衰老模型小鼠的實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

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1 邱俊欽;人骨形態(tài)蛋白-2基因重組腺病毒載體的構(gòu)建及修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

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7 遲建光;Ad-BDNF轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)乳鼠雪旺細(xì)胞的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2008年

8 李偉;鼠重組IL-12腺病毒經(jīng)脂質(zhì)體包埋轉(zhuǎn)染Kupffer細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2006年

9 郭浩;小鼠CCR7重組腺病毒轉(zhuǎn)染未成熟樹突狀細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2008年

10 鐘聲;攜帶人VEGF121和BMP2雙基因重組腺病毒載體構(gòu)建、鑒定及其轉(zhuǎn)染HEK293A細(xì)胞[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2011年

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本文編號：1134281