本文關(guān)鍵詞：人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)方法的改進(jìn)

  更多相關(guān)文章： 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 鑒定 細(xì)胞培養(yǎng)

【摘要】：目的建立高效、可靠、經(jīng)濟(jì)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)方法,為體外研究血管內(nèi)皮細(xì)胞提供實(shí)驗(yàn)手段。方法取健康剖腹產(chǎn)新生嬰兒臍帶,立即用0.1%Ⅰ型膠原酶室溫消化,得血管內(nèi)皮細(xì)胞,置于5%CO2、37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行原代培養(yǎng),培養(yǎng)基采用M199培養(yǎng)基,含有10%胎牛血清、2 mmol/L谷氨酰胺、50μg/ml肝素鈉、10 u/mlbFGF(貝復(fù)濟(jì),牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子,basic fibro blast growth factor)、100 u/ml青霉素、50 u/ml慶大霉素。在倒置顯微鏡下觀(guān)察原代及傳代細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn),同時(shí)用免疫組織化學(xué)的方法對(duì)所得細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果采用0.1%Ⅰ型膠原酶灌注法及改良培養(yǎng)基獲得了相當(dāng)數(shù)量的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞。光鏡下觀(guān)察見(jiàn)大量3~4個(gè)成團(tuán)的內(nèi)皮細(xì)胞。細(xì)胞接種后4 h開(kāi)始貼壁生長(zhǎng),5 d左右可融合成片,原代細(xì)胞呈小三角形、圓形或梭形,細(xì)胞分布不均勻,成簇生長(zhǎng),互不重疊;傳代細(xì)胞多為扁平多角形鋪路石狀鑲嵌排列,3 d左右可融合成片。免疫組化可見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞胞漿中人第Ⅷ因子相關(guān)抗原呈陽(yáng)性反應(yīng)。結(jié)論Ⅰ型膠原酶灌注法是獲得臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的一種可取方法,成功率高,可靠性大。改良培養(yǎng)基能很好地促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)及傳代擴(kuò)增,可成功構(gòu)建體外研究血管內(nèi)皮細(xì)胞的模型。
【作者單位】： 福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬寧德市醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 鑒定 細(xì)胞培養(yǎng)
【基金】：福建省衛(wèi)生廳青年科研課題(2011-1-45) 寧德市科學(xué)技術(shù)計(jì)劃項(xiàng)目(20110008),細(xì)胞分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室(一級(jí))
【分類(lèi)號(hào)】：R329
【正文快照】： 糖尿病血管病變(Diabetic vasculopathy)是常見(jiàn)的糖尿病并發(fā)癥之一,也是導(dǎo)致糖尿病病人死亡的主要原因之一,多種因素參與了這一病理過(guò)程,其中血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂是主要的發(fā)病機(jī)制[1,2]。因此,建立血管內(nèi)皮細(xì)胞模型,研究?jī)?nèi)皮細(xì)胞功能變化與糖尿病血管病變的關(guān)系以及藥物對(duì)血

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 徐明杰;王瑋;;大鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞的純化培養(yǎng)與鑒定[J];局解手術(shù)學(xué)雜志;2008年06期

2 龐小燕;張紅菱;代怡然;陳漢想;;人臍血內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[J];武漢理工大學(xué)學(xué)報(bào);2009年12期

3 于美娟;張雅妮;馮善偉;熊符;張成;;小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的建立[J];解剖學(xué)研究;2009年06期

4 黃粵;戴麗冰;鐘曉e

本文編號(hào)：1118299