本文關(guān)鍵詞：富血小板血漿與血小板裂解液對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖影響的比較

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【摘要】：目的通過(guò)對(duì)比分析富血小板血漿(platelet rich plasma,PRP)與血小板裂解液(platelet lysate,PL)對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)生長(zhǎng)增殖、細(xì)胞周期的作用,探討二者對(duì)大鼠BMSCs生長(zhǎng)增殖的影響。方法取20只4周齡SD大鼠,采用全骨髓分離培養(yǎng)法擴(kuò)增傳代BMSCs,并采用流式細(xì)胞儀鑒定;另取30只12周齡SD大鼠心內(nèi)采血,梯度離心法獲得PRP,采用3次離心結(jié)合反復(fù)凍融法制備PL。取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的第3代BMSCs進(jìn)行實(shí)驗(yàn),根據(jù)培養(yǎng)基成分不同將實(shí)驗(yàn)分為7組,普通完全培養(yǎng)基組(A組)、1%PRP條件培養(yǎng)基組(B組)、1%PL條件培養(yǎng)基組(C組)、5%PRP條件培養(yǎng)基組(D組)、5%PL條件培養(yǎng)基組(E組)、10%PRP條件培養(yǎng)基組(F組)及10%PL條件培養(yǎng)基組(G組)。MTT檢測(cè)BMSCs增殖情況;免疫熒光檢測(cè)BMSCs中增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)情況;流式細(xì)胞儀檢測(cè)BMSCs細(xì)胞周期的變化;蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)CyclinD1和p27Kip1蛋白表達(dá)。結(jié)果培養(yǎng)24、48、72h時(shí),1%、5%、10%PRP與1%、5%、10%PL條件培養(yǎng)基組均可以促進(jìn)BMSCs的增殖,并具有時(shí)間、劑量依賴性(P0.05);相同濃度的PRP與PL對(duì)BMSCs增殖作用的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。免疫熒光檢測(cè)顯示,PRP與PL均可以促進(jìn)PCNA蛋白表達(dá)(P0.05),且呈劑量依賴性(P0.01)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示,不同濃度PRP及PL條件培養(yǎng)基組與普通完全培養(yǎng)基組比較,G0/G1期細(xì)胞比例逐漸減少,S、G2/M期細(xì)胞比例逐漸增多,增殖指數(shù)(PI)升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),并呈劑量依賴性(P0.05);然而,相同濃度的PRP及PL對(duì)BMSCs細(xì)胞周期的影響相似,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)結(jié)果顯示,5%PRP與5%PL能促進(jìn)CyclinD1表達(dá)上調(diào)和p27Kip1表達(dá)下調(diào)。結(jié)論不同濃度PRP與PL能夠通過(guò)上調(diào)CyclinD1以及抑制p27Kip1蛋白的表達(dá),加快體外培養(yǎng)的大鼠BMSCs的細(xì)胞周期進(jìn)程,促進(jìn)BMSCs增殖,并呈現(xiàn)顯著的時(shí)間、劑量依賴性;BMSCs增殖過(guò)程中,相同濃度PL與PRP的促增殖效果相同,PL可能代替PRP促進(jìn)骨缺損修復(fù)。
【作者單位】： 河北聯(lián)合大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究中心;河北聯(lián)合大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室;河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 富血小板血漿 血小板裂解液 組織工程 細(xì)胞周期 細(xì)胞增殖
【基金】：唐山市科技局重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)項(xiàng)目(10140201A-12)~~
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 近年來(lái),血液系統(tǒng)不同成分在骨再生和修復(fù)過(guò)程中所發(fā)揮的重要作用引起越來(lái)越多的關(guān)注。已有眾多研究關(guān)注凝血機(jī)制與骨再生修復(fù)之間的聯(lián)系以及血小板成分對(duì)骨再生的促進(jìn)作用[1-2]。創(chuàng)傷等原因激發(fā)了凝血機(jī)制后,被激活的血小板將釋放出多種生物活性物質(zhì),如凝血因子、促血管活性因

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1087679