酪氨酸激酶受體KIT在小鼠結(jié)腸黏膜上皮的表達(dá)及其功能
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【摘要】:目的探討酪氨酸激酶受體KIT在小鼠結(jié)腸黏膜上皮的表達(dá)及作用。方法應(yīng)用Western blotting和RT-PCR技術(shù)檢測c-kit基因及KIT蛋白在野生型C57BL/6小鼠結(jié)腸黏膜上皮的表達(dá);用免疫熒光染色顯示野生型C57BL/6小鼠以及乙基亞硝酸鈉(ENU)誘變的c-kit基因點突變純合子小鼠(Wadsm/m)結(jié)腸黏膜上皮KIT陽性細(xì)胞的部位;腹腔注射5-溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)(30 mg/kg)觀察對比野生型以及Wadsm/m小鼠結(jié)腸黏膜上皮BrdU摻入情況及動態(tài)變化,分析KIT在結(jié)腸黏膜上皮更新過程的作用。結(jié)果 RT-PCR檢測結(jié)果表明,在野生型小鼠結(jié)腸黏膜組織表達(dá)c-kit基因,Western blotting證明在腸黏膜組織存在KIT蛋白;免疫熒光染色顯示,KIT陽性細(xì)胞位于結(jié)腸黏膜上皮,主要位于腸腺隱窩基底部,但是Wadsm/m小鼠KIT陽性細(xì)胞數(shù)以及KIT蛋白表達(dá)量較野生型小鼠明顯減少;BrdU摻入實驗發(fā)現(xiàn),Wadsm/m小鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸黏膜上皮BrdU攝入和更新速度較野生型小鼠明顯減慢。結(jié)論結(jié)腸黏膜上皮表達(dá)KIT蛋白與結(jié)腸黏膜上皮的更新密切相關(guān)。
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院組織學(xué)胚胎學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: KIT 腸上皮更新 結(jié)腸黏膜 免疫印跡法 小鼠
【基金】:北京市教育委員會科技計劃重點資助項目(KZ201311025001)
【分類號】:R341
【正文快照】: 酪氨酸激酶受體KIT(CD117),也稱干細(xì)胞因子受體,為經(jīng)典Ⅲ型酪氨酸激酶受體家族成員,正常情況下,表達(dá)于某些特定原始造血祖細(xì)胞、成熟細(xì)胞中,后者主要包括:肥大細(xì)胞、生殖細(xì)胞、黑色素細(xì)胞、胃腸道起搏細(xì)胞-Cajal間質(zhì)細(xì)胞(interstitial cellsof Cajal,ICCs)及上皮細(xì)胞[1]。KIT
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