本文關(guān)鍵詞：大腸埃希菌外膜蛋白T水解人防御素-4作用

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【摘要】：目的探討外膜蛋白T(OmpT)在大腸埃希菌CFT073致尿路感染中的作用機(jī)制。方法以人膀胱癌上皮細(xì)胞5637的cDNA為模版,擴(kuò)增人防御素-4(HBD-4)基因,連接至質(zhì)粒pET-28a,重組質(zhì)粒經(jīng)轉(zhuǎn)化、誘導(dǎo)和純化處理后獲得His-HBD-4融合蛋白;采用瓊脂糖擴(kuò)散法和最小抑菌濃度方法檢測(cè)HBD-4對(duì)ompT野生株、敲除株和回補(bǔ)株的抗菌活性,并分別觀察比較ompT野生株CFT073、敲除株和回補(bǔ)株水解HBD-4的差異。結(jié)果通過(guò)測(cè)序鑒定及雙酶切電泳證實(shí)成功構(gòu)建HBD-4原核表達(dá)載體pET-28a-HBD-4,獲得HBD-4體外表達(dá)菌株;HBD-4對(duì)CFT073與ompT敲除株的最小抑菌濃度不同,野生株為10μg/mL,敲除株為6μg/mL;與HBD-4共同孵育后,敲除株的生長(zhǎng)狀態(tài)受到抑制,但對(duì)野生株的影響較小。結(jié)論初步證實(shí)ompT作為毒力因子參與對(duì)人固有免疫系統(tǒng)成分的水解,在大腸桿菌致尿路感染的過(guò)程中發(fā)揮重要作用。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)院微生物系;
【關(guān)鍵詞】： 大腸埃希菌 外膜蛋白T(OmpT) 尿路感染 防御素-(HBD-)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(30972637) 南方醫(yī)科大學(xué)公衛(wèi)學(xué)院院長(zhǎng)基金(GW201101)
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 抗菌肽是一類內(nèi)源性抗微生物肽,廣泛分布于生物體內(nèi),具有廣譜抗菌等特點(diǎn),也是宿主天然免疫系統(tǒng)中的重要組成部分。人防御素-4(human-beta-defensin-4,HBD-4)屬于陽(yáng)離子抗菌肽中的一種,具有抗菌活性,主要分布于人中性粒細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、肺和腸上皮細(xì)胞,在泌尿系統(tǒng)中也有一定量

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本文編號(hào)：1078673