本文關(guān)鍵詞：黃芪甲苷單克隆抗體的制備及鑒定

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【摘要】：人工合成黃芪甲苷(AstragalosideⅣ,簡(jiǎn)稱(chēng)AST)的免疫抗原AST-BSA(黃芪甲苷-牛血清白蛋白)和包被抗原AST-OVA(黃芪甲苷-卵清白蛋白),以AST-BSA為免疫原,分5次免疫Balb/C小鼠,取免疫脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,HAT篩選,有限稀釋法克隆。建立分泌單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。采用間接ELISA和間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)法分別檢測(cè)抗體效價(jià)和特異性。結(jié)果免疫小鼠血清抗體效價(jià)達(dá)1∶27000,獲得兩株穩(wěn)定分泌抗AST單克隆抗體的細(xì)胞株,分別命名為1D5和3D11,以3D11細(xì)胞株制備的單抗檢測(cè)AST顯示在0.01~1μg/mL呈線(xiàn)性關(guān)系,檢測(cè)范圍達(dá)50~300 ng/mL,制備的單抗可用于AST含量的檢測(cè)。該方法有望用于AST免疫檢測(cè)試劑的研制開(kāi)發(fā)。
【作者單位】： 江蘇大學(xué)食品與生物工程學(xué)院;江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院;江蘇大學(xué)藥學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 黃芪甲苷 單克隆抗體 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定
【基金】：江蘇省2012年度普通高校研究生科研創(chuàng)新計(jì)劃(CX-LX12 0669) 江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院2012年度院級(jí)科研重點(diǎn)項(xiàng)目(ZD201205)
【分類(lèi)號(hào)】：R392
【正文快照】： 黃芪甲苷(AstragalosideⅣ,簡(jiǎn)稱(chēng)AST)是中藥黃芪藥理活性的主要物質(zhì)之一,為黃芪及其制劑質(zhì)量鑒定的指標(biāo)成分。藥理研究表明:AST具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、保護(hù)組織器官、降低血糖、抗細(xì)胞凋亡和抗炎抗病毒等多方面的作用,具有非常廣闊的發(fā)展前景[1]。目前檢測(cè)AST的方法有高效液相色

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本文編號(hào)：1076461