本文關鍵詞：黃芪甲苷單克隆抗體的制備及鑒定

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【摘要】：人工合成黃芪甲苷(AstragalosideⅣ,簡稱AST)的免疫抗原AST-BSA(黃芪甲苷-牛血清白蛋白)和包被抗原AST-OVA(黃芪甲苷-卵清白蛋白),以AST-BSA為免疫原,分5次免疫Balb/C小鼠,取免疫脾細胞與骨髓瘤細胞進行融合,HAT篩選,有限稀釋法克隆。建立分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞株。采用間接ELISA和間接競爭ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)法分別檢測抗體效價和特異性。結果免疫小鼠血清抗體效價達1∶27000,獲得兩株穩(wěn)定分泌抗AST單克隆抗體的細胞株,分別命名為1D5和3D11,以3D11細胞株制備的單抗檢測AST顯示在0.01~1μg/mL呈線性關系,檢測范圍達50~300 ng/mL,制備的單抗可用于AST含量的檢測。該方法有望用于AST免疫檢測試劑的研制開發(fā)。
【作者單位】： 江蘇大學食品與生物工程學院;江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學院;江蘇大學藥學院;
【關鍵詞】： 黃芪甲苷 單克隆抗體 酶聯(lián)免疫吸附測定
【基金】：江蘇省2012年度普通高校研究生科研創(chuàng)新計劃(CX-LX12 0669) 江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學院2012年度院級科研重點項目(ZD201205)
【分類號】：R392
【正文快照】： 黃芪甲苷(AstragalosideⅣ,簡稱AST)是中藥黃芪藥理活性的主要物質之一,為黃芪及其制劑質量鑒定的指標成分。藥理研究表明:AST具有調(diào)節(jié)機體免疫力、保護組織器官、降低血糖、抗細胞凋亡和抗炎抗病毒等多方面的作用,具有非常廣闊的發(fā)展前景[1]。目前檢測AST的方法有高效液相色

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 趙壽經(jīng);侯春喜;錢延春;徐立新;孫莉麗;;人參皂苷Rb1單克隆抗體的制備與鑒定[J];吉林大學學報(工學版);2007年01期

2 郭旭;劉吉華;余伯陽;;中藥中活性物質單克隆抗體的制備及其免疫檢測應用[J];南京曉莊學院學報;2010年03期

3 段立軍;孫博航;;黃芪甲苷的研究進展[J];沈陽藥科大學學報;2011年05期

4 楊新平;陳旭;李芳耀;阮方;林家遜;鐘海雁;;中藥莪術中抗腫瘤成分莪術醇人工抗原的合成與鑒定[J];時珍國醫(yī)國藥;2010年05期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蘇玉珂;;黃芪總皂苷的提取工藝及分析方法研究[J];中國醫(yī)藥導刊;2012年05期

2 秦倩倩;張立艷;白換力;董海兵;吳帥成;畢文巖;宋舟;張翠;褚秀玲;申海清;;黃芪甲苷調(diào)節(jié)雞異嗜性粒細胞吞噬和殺傷大腸埃希菌O78作用的體外研究[J];動物醫(yī)學進展;2012年07期

3 趙威;李云濤;楊波;楊書良;;HPLC-ELSD法測定胃泰咀嚼片中黃芪甲苷質量比[J];哈爾濱商業(yè)大學學報(自然科學版);2012年03期

4 徐立新;趙壽經(jīng);梁彥龍;錢延春;金士琨;;外源調(diào)節(jié)物質對人參毛狀根生長及皂苷合成的影響[J];吉林大學學報(工學版);2010年06期

5 屈會化;趙琰;王雪茜;楊愛玲;李翼飛;盧建秋;王慶國;;黃芩苷人工抗原的合成與鑒定[J];北京中醫(yī)藥大學學報;2010年09期

6 李麗;李勇文;段小群;陳旭;楊新平;梁成欽;盧曦;李梅;;羅漢果甜苷V人工抗原免疫原性檢測法的建立與評價[J];免疫學雜志;2011年10期

7 王瑩;鄭浩;何成華;張愛華;張海彬;;伏馬菌素B_1人工抗原的鑒定及抗體的制備[J];南京農(nóng)業(yè)大學學報;2011年05期

8 李全斌;易生富;李紀元;楊遠榮;孫亞楠;;抗病毒合劑質量標準研究[J];遼寧中醫(yī)藥大學學報;2013年07期

9 劉銘;駱丹;林秉獎;錢齊宏;閔瑋;;黃芪甲苷對長波紫外線影響人成纖維細胞的干預研究[J];北京中醫(yī)藥大學學報;2013年05期

10 譚成芳;劉曉華;富志軍;;黃芪甲苷在大鼠體內(nèi)的藥代動力學研究[J];海峽藥學;2013年08期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 胡芳弟;幾種中藥活性組分的藥物代謝動力學及電化學分析研究[D];蘭州大學;2011年

2 付樹濱;PMSG劑量對中國荷斯坦奶牛繁殖性能的影響以及抗PMSG抗體制備和應用研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李麗;羅漢果甜苷V人工抗原的制備及免疫學特性研究[D];廣西醫(yī)科大學;2012年

2 烏日汗;黃芪的代謝組學研究[D];中央民族大學;2012年

3 龐然;前列消ve湯治療激素難治性前列腺癌的療效觀察[D];中國中醫(yī)科學院;2012年

4 廖國平;清開靈注射液致小鼠IgE介導的過敏反應模型建立與綠原酸變應原性研究[D];南方醫(yī)科大學;2012年

5 宋舟;中藥方劑香芪湯對RAW264.7巨噬細胞炎癥信號通路的調(diào)節(jié)機制研究[D];吉林大學;2013年

6 秦倩倩;黃芪甲苷和穿心蓮內(nèi)酯促進雞異嗜性粒細胞吞噬殺傷E.coil O78作用的分子機制[D];吉林大學;2013年

7 劉曉亞;黃芪甲苷和環(huán)黃芪醇的體內(nèi)外代謝研究[D];北京中醫(yī)藥大學;2013年

8 蘇歆;黃芩苷單克隆抗體的制備及其酶聯(lián)免疫吸附分析方法的建立[D];北京中醫(yī)藥大學;2013年

9 張越;甘草酸、柚皮苷單克隆抗體的制備及其酶聯(lián)免疫分析方法的建立[D];北京中醫(yī)藥大學;2013年

10 劉洋;柴胡皂苷a人工抗原合成及其單克隆抗體的制備[D];北京中醫(yī)藥大學;2013年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李翔;朱臻宇;朱東亮;柴逸峰;婁子洋;;高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測梯度洗脫法測定黃芪藥材中黃芪甲苷的含量[J];第二軍醫(yī)大學學報;2006年03期

2 劉超;毛羽;肖麗麗;劉景利;許平平;魚紅閃;金鳳燮;;產(chǎn)黃芪甲苷酶的酶反應條件[J];大連工業(yè)大學學報;2008年02期

3 許平平;譚銀春;魚紅閃;金鳳燮;;酶轉化法提高黃芪甲苷的得率[J];大連工業(yè)大學學報;2009年01期

4 宋建武;晁志;董為人;;石杉堿甲人工抗原的合成、鑒定及免疫原性分析[J];第三軍醫(yī)大學學報;2009年21期

5 陳連康,曾立波,趙志強,陳安,叢林;膠體金標記檢測大麻單克隆抗體免疫試劑盒研制[J];中國法醫(yī)學雜志;2002年02期

6 廖秀清;熊平;肖曉山;;黃芪甲甙對大鼠肺缺血再灌注損傷的保護作用[J];廣東醫(yī)學;2009年12期

7 周軍;劉軍;;黃芪甲甙對大鼠局灶性腦缺血的保護作用及機制研究[J];醫(yī)學臨床研究;2008年05期

8 羅永姣;鄧暉;李雙杰;杜九中;;黃芪甲甙在Balb/C小鼠CVB3病毒性心肌炎中抗凋亡作用的機制[J];南華大學學報(醫(yī)學版);2010年03期

9 趙壽經(jīng);蔣磊;李軍華;許潔;;高產(chǎn)人參發(fā)根系的建立及發(fā)根中皂苷Rb_1的分離純化[J];吉林大學學報(工學版);2006年04期

10 楊曉雷;曹云;;黃芪甲苷的提取工藝研究[J];精細化工原料及中間體;2008年12期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉慎沛;田擁軍;楊燕;楊東亮;;高親和力抗乙型肝炎表面抗原單克隆抗體制備及檢測變異HBsAg方法的建立[J];華中科技大學學報(醫(yī)學版);2007年05期

2 劉軍桂;周寧新;張效東;;抗人FXYD6單克隆抗體的制備及鑒定[J];科學技術與工程;2009年10期

3 石爽;盧鋒;楊美華;莊輝;;赭曲霉毒素A單克隆抗體的制備及直接競爭酶聯(lián)免疫吸附法的建立[J];解放軍醫(yī)學雜志;2010年12期

4 曾淑君,李蘇,彭大偉,丘鵬新,伍宇平;人m_3受體單克隆抗體的研制(英文)[J];中國藥理學報;2000年04期

5 姚智,龐學文,郭淑君,田季德,陳慰峰;人白細胞介素4單克隆抗體的研制及其鑒定[J];北京大學學報(醫(yī)學版);1991年03期

6 江濤;柳楨;李楠;李燕俊;高秀芬;計融;;抗黃曲霉毒素B_1單抗獨特型抗體的制備[J];中國食品衛(wèi)生雜志;2009年05期

7 彭祥兵;陳雯;詹騫;項美娟;張愛華;楊曉明;;百日咳絲狀血凝素單克隆抗體的制備及ELISA定量檢測方法的建立[J];中國生物制品學雜志;2011年05期

8 蔡碧雙;邵幼巖;林紀昀;徐金森;;甘草酸人工抗原的合成鑒定及免疫原性分析[J];中國生化藥物雜志;2008年01期

9 范文紅;畢華;饒春明;;重組人源化兔抗血管內(nèi)皮生長因子單克隆抗體的抗原結合活性測定[J];中國生物制品學雜志;2011年09期

10 丁寧;劉承武;李志杰;劉靖華;鄧鵬;姜勇;;細胞酶聯(lián)免疫吸附試驗在檢測噬菌體陽性克隆中的應用和改進[J];中國病理生理雜志;2008年09期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李振宇;趙益明;董寧征;沈飛;阮長耿;;抗FⅧ-C2區(qū)單克隆抗體的制備及鑒定[A];第11次中國實驗血液學會議論文匯編[C];2007年

2 陶薇;楊連華;何卓晶;洪艷;陳勇;;抗戊型肝炎病毒重組蛋白單克隆抗體的制備和鑒定[A];浙江省醫(yī)學會醫(yī)學微生物與免疫學及醫(yī)學病毒學學術年會論文匯編[C];2009年

3 馬翠卿;郭奕陽;顧海燕;曾瑞紅;楊麗娟;魏林;;一株抗A族鏈球菌表面蛋白Fba的單克隆抗體對應的表位與Fba結合調(diào)節(jié)蛋白FH的位點重疊[A];河北省免疫學會第六次免疫學大會資料匯編[C];2010年

4 杜雪梅;唐麗;任飛W，

本文編號：1076461