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表達(dá)mIFN-γ的重組鏈球菌的構(gòu)建及其對(duì)重組Sj-F1鏈球菌疫苗免疫調(diào)節(jié)作用研究

發(fā)布時(shí)間:2017-10-21 05:05

  本文關(guān)鍵詞:表達(dá)mIFN-γ的重組鏈球菌的構(gòu)建及其對(duì)重組Sj-F1鏈球菌疫苗免疫調(diào)節(jié)作用研究


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【摘要】:目的構(gòu)建表達(dá)mIFN-γ的重組鏈球菌,并與重組日本血吸蟲Sj-F1鏈球菌疫苗進(jìn)行聯(lián)合免疫,觀察IFN-γ對(duì)重組日本血吸蟲Sj-F1鏈球菌疫苗的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)。方法用PCR法擴(kuò)增mIFN-γ基因,亞克隆至鏈球菌重組質(zhì)粒pGMB1,經(jīng)PCR、限制性酶切和測序鑒定篩選陽性重組子。將陽性重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化鏈球菌載體,經(jīng)抗生素抗性轉(zhuǎn)化及染色體PCR鑒定篩選陽性重組鏈球菌。用Streak blot和Western blot分析鑒定重組鏈球菌的表達(dá)情況。鑒定后的重組mIFN-γ鏈球菌與重組Sj-F1鏈球菌疫苗聯(lián)合應(yīng)用,經(jīng)滴鼻接種免疫昆明小鼠,觀察誘導(dǎo)產(chǎn)生的減蟲和減卵效果。結(jié)果成功構(gòu)建了分泌mIFN-γ重組鏈球菌。Streak blot和Western blot分析表明重組鏈球菌能分泌mIFN-γ并可穩(wěn)定遺傳。免疫保護(hù)性實(shí)驗(yàn)表明,重組mIFN-γ鏈球菌與重組日本血吸蟲Sj-F1鏈球菌疫苗聯(lián)合免疫,減蟲率和減卵率分別為31.56%和47.48%,與單用重組Sj-F1鏈球菌疫苗比較減蟲率和減卵率W4增加。結(jié)論結(jié)果表明,重組mIFN-γ鏈球菌能增強(qiáng)重組Sj-F1鏈球菌疫苗抗日本血吸蟲感染的保護(hù)力。
【作者單位】: 中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】日本血吸蟲 mIFN-γ Sj-F 重組鏈球菌 免疫
【基金】:湖南省自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(No:10JJ2012) 湖南省研究生科研創(chuàng)新項(xiàng)目(No:2011ssxt103)
【分類號(hào)】:R392.1
【正文快照】: IFN-γ是一種重要的Th1型細(xì)胞因子,能誘導(dǎo)Th0細(xì)胞分化成Th1細(xì)胞,增加抗原提呈細(xì)胞MHCⅡ類分子的表達(dá),并抑制Th2型細(xì)胞因子產(chǎn)生,使免疫應(yīng)答呈現(xiàn)Th1應(yīng)答優(yōu)勢,從而發(fā)揮抗感染、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用[1-2]。在小鼠血吸蟲感染中,IFN-γ可通過激發(fā)對(duì)童蟲的細(xì)胞毒作用和抑制肝纖維化

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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2 余俊龍;汪世平;何卓;戴橄;李文凱;姜孝新;曾少華;肖小芹;徐紹銳;呂志躍;彭先楚;周松華;劉雪琴;;日本血吸蟲中國株次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶的克隆、表達(dá)及其免疫保護(hù)性研究(英文)[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2006年07期

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【相似文獻(xiàn)】

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7 楊光榮,熊孟韜,吳興,范崇正,陶開會(huì),吳鶴松,蘇祿權(quán),楊品香,段彩虹;鼠類自然感染日本血吸蟲情況分析[J];中國媒介生物學(xué)及控制雜志;2000年01期

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4 張艷麗;趙r嚺,

本文編號(hào):1071417


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