本文關(guān)鍵詞：腸道病毒71型VP1蛋白單克隆抗體的制備及初步鑒定

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【摘要】：目的:制備腸道病毒71型(enterovirus 71,EV71)VP1外殼蛋白單克隆抗體。方法:利用重組純化的EV71-VP1蛋白為抗原免疫BALB/c鼠,按常規(guī)雜交瘤技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞融合,對陽性雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選及亞克隆,獲得1株能穩(wěn)定分泌抗EV71-VP1抗體的雜交瘤細(xì)胞株6F2B9,細(xì)胞體外擴(kuò)大培養(yǎng)后的上清用Protein G柱純化,超濾后用BCA法測其濃度,用免疫球蛋白亞類鑒定試劑盒鑒定單克隆抗體亞型,間接ELISA方法檢測其效價和特異性,間接免疫熒光法檢測其與EV71病毒的特異性結(jié)合能力。結(jié)果:本研究得到的抗EV71-VP1抗體DSE-136,純化后濃度為1.9 g/L,免疫球蛋白亞類為IgG2b,輕鏈屬于κ鏈;間接ELISA檢測效價為1∶3.2×105;間接免疫熒光結(jié)果顯示其可與EV71病毒特異性結(jié)合。結(jié)論:成功制備出1個效價高、特異性好的抗EV71-VP1單克隆抗體DSE-136,為VP1抗原診斷、疫苗研發(fā)及其效果評價奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學(xué)系;江蘇省疾病預(yù)防控制中心病原微生物研究所;南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】： 腸道病毒型 VP蛋白 單克隆抗體
【基金】：國家科技重大專項(2008ZX10002-001,2009ZX10004-904) 江蘇省醫(yī)學(xué)重點人才項目(RC2011082)
【分類號】：R392.11
【正文快照】： 手足口病是5歲以下嬰幼兒中的常見傳染病,可由多種腸道病毒引起[1],主要為腸道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯薩奇A組16型(cox-sackievirus A16,CoxA16)。與coxA16相比,EV71除可引起手足口病和皰疹性咽峽炎外,尚可引起無菌性腦膜炎、腦干腦炎、神經(jīng)源性肺水腫、急性遲緩

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【相似文獻(xiàn)】

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4 杜雪梅;唐麗;任飛W，

本文編號：1068391