結(jié)核分枝桿菌H37Rv尿嘧啶糖苷酶基因的克
本文關(guān)鍵詞:結(jié)核分枝桿菌H37Rv尿嘧啶糖苷酶基因的克隆、表達(dá)及酶學(xué)性質(zhì)分析
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【摘要】:本研究旨在構(gòu)建結(jié)核分枝桿菌H37Rv尿嘧啶糖苷酶UNG的原核表達(dá)載體及酶學(xué)分析,為結(jié)核分枝桿菌的堿基切除修復(fù)系統(tǒng)的研究奠定基礎(chǔ)。提取結(jié)核分枝桿菌H37Rv基因組DNA,PCR法擴(kuò)增ung基因,構(gòu)建pQE-30-ung重組質(zhì)粒,在表達(dá)宿主菌E.coli M15中誘導(dǎo)表達(dá)蛋白,經(jīng)Ni 2+-NTA親和層析柱和凝膠過濾層析純化,通過表面等離子共振試驗(yàn)觀察該蛋白與錯(cuò)配DNA結(jié)合的情況。結(jié)果顯示,成功構(gòu)建了原核表達(dá)載體pQE-30-ung,并能在宿主菌E.coli M15中表達(dá),純化后的酶具有識(shí)別異常DNA活性,為進(jìn)一步研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 解放軍第175醫(yī)院/廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】: 結(jié)核分枝桿菌 尿嘧啶糖苷酶 表達(dá)純化 表面等離子共振
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: 結(jié)核病(tuberculosis,TB)是一種由結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的人獸共患的慢性傳染病[1,2],在我國的發(fā)病率呈回升趨勢(shì)[3]。隨著化療藥物的廣泛應(yīng)用,結(jié)核桿菌的耐藥率日趨上升,特別是耐多藥結(jié)核病(MDR-TB),給結(jié)核病的控制工作帶來巨大困難。因此尋找一
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1 鳳,
本文編號(hào):1062612
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