本文關(guān)鍵詞：EBV編碼潛伏膜蛋白2A抗原表位的串聯(lián)表達(dá)及其免疫原性分析

  更多相關(guān)文章： 鼻咽癌 EB病毒 潛伏膜蛋白A 多克隆抗體 重組基因

【摘要】：目的:制備具有免疫原性的EB病毒潛伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)的表位串聯(lián)蛋白并分析其免疫學(xué)特性。方法:用DNAstar軟件分析LMP2A的抗原表位,將預(yù)測的免疫原性較強(qiáng)的兩個表位通過基因合成串聯(lián)在一起,克隆到原核表達(dá)載體pET28a中,經(jīng)大腸桿菌BL21表達(dá)并純化。制備的含LMP2A表位重組蛋白經(jīng)SDS-PAGE、Western blot鑒定后,免疫小鼠制備多克隆抗體,以ELISA檢測抗體的效價,免疫組織化學(xué)法檢測該抗體對天然LMP2A的特異性。結(jié)果:通過原核表達(dá)與純化,獲得高純度的表位融合蛋白,經(jīng)小鼠免疫并制備效價高且特異性的小鼠抗LMP2A的多克隆抗體,該抗體可用于ELISA和免疫組織化學(xué)分析。結(jié)論:本研究制備的表位融合蛋白,具有天然抗原的免疫原性,可制備能特異性識別天然LMP2A分子的多克隆抗體,為利用表位融合蛋白篩選全人源基因工程抗體奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科;南京醫(yī)科大學(xué)衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;江蘇省省級機(jī)關(guān)醫(yī)院耳鼻咽喉科;南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科;南京軍區(qū)軍事醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 鼻咽癌 EB病毒 潛伏膜蛋白A 多克隆抗體 重組基因
【基金】：南京醫(yī)科大學(xué)科技發(fā)展基金重點(diǎn)項(xiàng)目(NY2005 D2D13) 江蘇省自然科學(xué)基金(BK2008481) 江蘇省科技廳社會發(fā)展支撐計劃項(xiàng)目(BE2009152)
【分類號】：R392.11
【正文快照】： 鼻咽癌是來源于鼻咽上皮的高度惡性腫瘤,腫瘤進(jìn)展極易侵犯顱底等重要結(jié)構(gòu),并較早發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。在初診的患者中,Ⅲ、Ⅳ期鼻咽癌約占總病例的70%左右。放療在過去很長一段時間都是鼻咽癌的標(biāo)準(zhǔn)治療方法,但單純放療鼻咽癌的5年生存率僅50%左右,而晚期鼻咽癌(Ⅲ

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本文編號：1058713